Pagrindinis skirtumas – srauto citometrija ir FACS
Ląstelių teorijos kontekste ląstelės yra pagrindinis visų gyvų organizmų struktūrinis ir funkcinis vienetas. Ląstelių rūšiavimas yra metodika, kuri naudojama atskirti skirtingas ląsteles pagal fiziologines ir morfologines savybes. Jie gali turėti tarpląstelinių arba tarpląstelinių savybių. DNR, RNR ir b altymų sąveika laikoma tarpląstelinėmis interaktyviomis savybėmis, o forma, dydis ir skirtingi paviršiaus b altymai laikomi tarpląstelinėmis savybėmis. Šiuolaikiniame moksle ląstelių rūšiavimo metodikos padėjo atlikti skirtingus biologinių tyrimų tyrimus ir nustatyti naujus principus atliekant medicinos tyrimus. Ląstelių rūšiavimas atliekamas naudojant įvairias metodikas, apimančias tiek primityvias su mažiau įranga, tiek pažangias technologines metodikas, naudojant sudėtingas mašinas. Srauto citometrija, fluorescencinis aktyvuotų ląstelių rūšiavimas (FACS), magnetinė ląstelių atranka ir pavienių ląstelių rūšiavimas yra pagrindinės naudojamos metodikos. Srauto citometrija ir FACS yra sukurti siekiant diferencijuoti ląsteles pagal jų optines savybes. FACS yra specializuotas srauto citometrijos tipas. Srauto citometrija – tai metodika, naudojama analizuojant heterogeninę ląstelių populiaciją pagal skirtingas ląstelės paviršiaus molekules, dydį ir tūrį, leidžianti ištirti pavienes ląsteles. FACS yra procesas, kurio metu ląstelių mišinio mėginys surūšiuojamas pagal jų šviesos sklaidos ir fluorescencijos charakteristikas į dvi ar daugiau talpyklų. Tai yra pagrindinis skirtumas tarp srauto citometrijos ir FACS.
Kas yra srauto citometrija?
Srauto citometrija yra metodas, naudojamas tirti ir nustatyti tarpląstelinių molekulių ir ląstelės paviršiaus ekspresiją bei apibrėžti ir apibūdinti skirtingus ląstelių tipus. Jis taip pat naudojamas nustatant ląstelių tūrį ir dydį bei įvertinant išskirtų subpopuliacijų grynumą. Tai leidžia maždaug tuo pačiu metu atlikti kelių parametrų pavienių langelių įvertinimą. Srauto citometrija naudojama fluorescencijos, kuri susidaro dėl fluorescenciniu būdu pažymėtų antikūnų, padedančių identifikuoti b altymus arba ligandus, kurie jungiasi prie susijusių ląstelių, intensyvumui matuoti.
01 pav.: srauto citometrija
Paprastai srauto citometrija daugiausia apima tris posistemes. Tai yra skysčiai, elektronika ir optika. Srauto citometrijoje yra penki pagrindiniai komponentai, naudojami ląstelių rūšiavimui. Tai yra srauto elementas (skysčio srautas, naudojamas joms transportuoti ir optinio jutimo procesui suderinti), matavimo sistema (gali būti įvairių sistemų, įskaitant gyvsidabrio ir ksenono lempas, didelės galios vandeniu aušinamas arba mažos galios oru aušinami lazeriai arba diodiniai lazeriai), ADC; Analogo to Digital Converter sistema, stiprinimo sistema ir kompiuteris analizei. Gavimas yra procesas, kurio metu duomenys renkami iš mėginių naudojant srauto citometrą. Šį procesą tarpininkauja kompiuteris, prijungtas prie srauto citometro. Kompiuteryje esanti programinė įranga analizuoja informaciją, kuri į kompiuterį tiekiama iš srauto citometro. Programinė įranga taip pat turi galimybę reguliuoti eksperimento parametrus, kontroliuojančius srauto citometrą.
Kas yra FACS?
Srauto citometrijos kontekste Fluorescence aktyvuotų ląstelių rūšiavimas (FACS) yra metodas, naudojamas diferencijuojant ir rūšiuojant biologinių ląstelių mišinio mėginį. Ląstelės atskiriamos iš dviejų ar daugiau talpyklų. Rūšiavimo metodas pagrįstas fizinėmis ląstelės savybėmis, įskaitant ląstelės šviesos sklaidą ir fluorescencines savybes. Tai svarbi mokslinė metodika, kurią galima panaudoti norint gauti patikimus kiekybinius ir kokybinius fluorescencinių signalų, skleidžiamų iš kiekvienos ląstelės, rezultatus. FACS metu iš pradžių iš anksto gautas ląstelių mišinys; suspensija nukreipiama į siauro, greitai tekančio skysčio srauto centrą. Skysčio srautas skirtas atskirti suspensijos ląsteles pagal kiekvienos ląstelės skersmenį. Suspensijos srautui taikomas vibracijos mechanizmas, dėl kurio susidaro atskiri lašeliai.
02 pav.: FACS
Sistema sukalibruota taip, kad būtų sukurtas vienas lašelis su viena ląstele. Prieš pat susidarant lašeliams, srauto suspensija juda fluorescencijos matavimo aparatu, kuris nustato kiekvienai ląstelei būdingą fluorescenciją. Lašelių susidarymo vietoje dedamas elektros įkrovimo žiedas, kurio krūvis sukeliamas žiedui prieš matuojant fluorescencijos intensyvumą. Kai iš suspensijos srauto susidaro lašeliai, lašeliuose sulaikomas krūvis, kuris patenka į elektrostatinę nukreipimo sistemą. Pagal įkrovą sistema nukreipia lašelius į skirtingus konteinerius. Mokesčio taikymo būdas skiriasi priklausomai nuo skirtingų FACS naudojamų sistemų. FACS naudojama įranga žinoma kaip fluorescencija aktyvuota ląstelių rūšiavimo priemonė.
Koks yra srauto citometrijos ir FACS panašumas?
Srauto citometrija ir FACS sukurti ląstelėms diferencijuoti pagal jų optines savybes
Kuo skiriasi srauto citometrija ir FACS?
Srauto citometrija vs FACS |
|
| Srauto citometrija yra metodika, kuri naudojama analizuojant nevienalytę ląstelių populiaciją pagal skirtingas ląstelių paviršiaus molekules, dydį ir tūrį, leidžianti ištirti pavienes ląsteles. | FACS yra procesas, kurio metu ląstelių mišinio mėginys surūšiuojamas pagal jų šviesos sklaidos ir fluorescencijos charakteristikas į du ar daugiau talpyklų. |
Santrauka – srauto citometrija prieš FACS
Ląstelė yra pagrindinis visų gyvų organizmų struktūrinis ir funkcinis vienetas. Ląstelių rūšiavimas yra procesas, kurio metu ląstelės išskiriamos ir diferencijuojamos į skirtingas kategorijas pagal jų tarpląstelines ir tarpląstelines savybes. Srauto citometrija ir FACS yra dvi svarbios ląstelių rūšiavimo metodikos. Abu procesai yra sukurti siekiant diferencijuoti ląsteles pagal jų optines savybes. Srauto citometrija – tai metodika, naudojama analizuojant heterogeninę ląstelių populiaciją pagal skirtingas ląstelės paviršiaus molekules, dydį ir tūrį, leidžianti ištirti pavienes ląsteles. FACS yra procesas, kurio metu ląstelių mišinio mėginys surūšiuojamas pagal jų šviesos sklaidos ir fluorescencijos charakteristikas į dvi ar daugiau talpyklų. Tai yra skirtumas tarp srauto citometrijos ir FACS.
Atsisiųskite srauto citometrijos ir FACS PDF versiją
Galite atsisiųsti šio straipsnio PDF versiją ir naudoti ją neprisijungus, kaip nurodyta citatos pastaboje. Atsisiųskite PDF versiją čia Skirtumas tarp srauto citometrijos ir FACS
