Pagrindinis skirtumas – vienasluoksnė ir pakabos kultūra
Audinių kultūra yra metodika, naudojama skatinti ląstelių, atskirtų nuo organizmo ir auginamų skirtingose auginimo terpėse, augimą. Audinių kultūroje kultūrinė terpė vaidina svarbų vaidmenį. Skirtingos ląstelės auga skirtingose auginimo terpėse, priklausomai nuo ląstelių fiziologinių ir cheminių savybių. Vienasluoksnė kultūra ir suspensijos kultūra yra du pagrindiniai kultūrų tipai, naudojami audinių kultūros procese. Vienasluoksnė kultūra yra nuo įtvirtinimo priklausoma kultūra, kurioje ląstelė auga, kai yra prijungta prie substrato, o suspensijos kultūra yra nuo tvirtinimo nepriklausoma kultūra, kurioje ląstelių agregatai naudojami ląstelių kultūroms skystoje terpėje sukurti. Tai yra pagrindinis skirtumas tarp vienasluoksnės kultūros ir suspensijos kultūros.
Kas yra vienasluoksnė kultūra?
Viensluoksnė kultūra apibrėžiama kaip kultūros rūšis, kai ląstelės kultivuojamos viename sluoksnyje ant kolbos arba Petri lėkštelės, kurioje yra auginimo terpė. Vienasluoksnė kultūra taip pat vadinama adherentine kultūra arba nuo tvirtinimo vietos priklausoma kultūra. Priežastis, dėl kurios kalbama apie prilipusią arba nuo tvirtinimo priklausomą kultūrą, yra ta, kad šioms ląstelėms augimo metu reikia prisitvirtinti substrato. Jie prilimpa prie ląstelių kultūros, kurioje yra substratas.
Substratai, kurie naudojami auginimo terpėje, turi būti įkrauti prieš naudojant. Šie įkrauti substratai skatina ląstelių sąveiką. Elektrinis jonų iškroviklis, dvivalenčių katijonų dangos ir gama spinduliuotė yra š altiniai, naudojami šiems substratams įkrauti. Vienasluoksnėje auginimo terpėje, kai ląstelės užsėjamos, augimas reguliuojamas naudojant procesą, vadinamą kontakto slopinimu. Sąlyčio slopinimo metu ląstelių augimas sustabdomas, kad būtų sustabdytas normalių ląstelių dauginimasis, kai jos suformuoja vienasluoksnį sluoksnį, pritvirtintą prie paviršiaus.
01 pav.: Prisirišusi kultūra
Ląstelės, kurių tvirtinimas priklauso nuo kitų substratų, vadinamos prilipusiomis ląstelėmis. Šios prilipusios ląstelės dažnai gaunamos iš organų audinių, tokių kaip inkstai ir kt. Šios ląstelės yra nejudrios ir paprastai yra prijungtos prie jungiamojo audinio. Todėl auginant šias ląsteles auginimo terpėje, turėtų būti numatyti visi šie esminiai augimo faktoriai. Vienasluoksnės kultūros svarba yra ta, kad ji imituoja pirmines natūralias sąlygas, kad ląstelė tinkamai įsitvirtintų.
Kas yra sustabdymo kultūra?
Suspensijos kultūrą galima apibrėžti kaip kultūros tipą, kai dauginasi mažas ląstelių agregatas arba pavienės ląstelės, suspenduotos skystoje terpėje, kuri nuolat maišoma. Kitaip tariant, suspensijos kultūra taip pat žinoma kaip ląstelių suspensijos kultūros ląstelių kultūra. Ši kultūra padeda sukurti pavienių ląstelių kultūras, kurios galėtų būti panaudotos tiriant augalų ląsteles, atsižvelgiant į jų skirtingus potencialus ir savybes. Šio aspekto tyrimas galėtų būti panaudotas norint suprasti ląstelių tarpusavio ryšius ir jų įtaką, kai kalbama apie daugialąsčius organizmus.
Pradinio augalo vystymosi metu susidaro kaliusas, kuris yra nediferencijuotų ląstelių masė. Toks augimo lygis sukelia kliūtis identifikuoti ląstelių įvykius augalo augimo ir vystymosi fazėse. Suspensijos kultūra buvo įvesta siekiant įveikti šią situaciją, nes ji buvo puiki auginimo terpė, skirta sukurti atskirų ląstelių kultūras iš mažų ląstelių agregatų, gautų iš kalio. Tai buvo panaudota tiriant įvairius morfologinius ir biocheminius aspektus pradinėse augalo vystymosi stadijose.
02 pav.: Suspensijos kultūra
Norint gauti idealią ląstelių kultūrą, įprastas būdas yra pernešti trapią kalio masę į maišomą skystą terpę, kurioje masė suskaidoma ir lengvai pasiskirsto. Po to dideli kauliukai išskrojami, išlaikant mažų ląstelių agregatai ir pavienės ląstelės. Tada šios ląstelės perkeliamos į kitą terpę. Aktyviai augančios ląstelės gaunamos po dviejų ar trijų savaičių.
Kokie yra vienasluoksnės ir pakabos kultūros panašumai?
- Tiek vienasluoksnės, tiek suspensijos kultūros yra dviejų tipų ląstelių kultūros, kurios naudojamos ląstelėms sukurti
- Tiek vienasluoksnės, tiek suspensijos kultūros auginamos tinkamoje auginimo terpėje.
- Tiek vienasluoksnės, tiek suspensijos kultūros dažniausiai naudojamos audinių kultūroje.
Kuo skiriasi vienasluoksnė ir pakabos kultūra?
Viensluoksnis prieš pakabos kultūrą |
|
| Vieno sluoksnio kultūra yra nuo tvirtinimo priklausoma kultūra, kurioje ląstelės auginamos, kai jos yra prijungtos prie substrato. | Suspensijos kultūra yra nuo tvirtinimo vietos nepriklausoma kultūra, kurioje dauginasi maži ląstelių agregatai arba pavienės ląstelės, suspenduotos skystoje terpėje, kuri maišoma. |
| Reikalavimai | |
| Vieno sluoksnio kultivavimui reikalingas audinių kultūra apdorotas indas, periodiškai paskirstomas. | Suspensijos kultūrą galima gauti naudojant ne audinių kultūrą apdorotus kraujagysles. |
| Augimo apribojimai | |
| Vieno sluoksnio kultūros augimą ribos paviršiaus plotas, kuris tiesiogiai veikia derlių. | Suspensijos kultūros augimą riboja ląstelių koncentracija terpėje. |
| Ląstelių disociacija | |
| Vienasluoksnėje kultūroje ląstelių disociacija vyksta mechaniškai arba fermentiškai. | Suspensijos kultūrai nereikia fermentų ir mechaninių priemonių, skirtų ląstelių disociacijai. |
| Ląstelės vizualizacija | |
| Vieno sluoksnio kultūra leidžia lengvai vizualizuoti ląsteles. | Sunkiau apžiūrėti ląsteles suspensijos kultūrose. |
| Funkcija | |
| Viensluoksnė kultūra naudojama citologijos, tyrimų ir nuolatinio produktų derliaus nuėmimo srityse. | Suspensijos kultūra naudojama masinei b altymų gamybai, tyrimams ir derliaus nuėmimui. |
Santrauka – vienasluoksnė prieš pakabos kultūrą
Vieno sluoksnio kultūra ir suspensijos kultūra yra dvi pagrindinės audinių kultūroje naudojamos kultūros. Vienasluoksnė kultūra yra nuo tvirtinimo vietos priklausoma kultūra. Ląstelės auginamos šioje kultūroje, kur jos pritvirtinamos prie kultūroje esančio substrato. Prieš naudojimą substratai įkraunami naudojant įvairius š altinius, tokius kaip dvivalentės dangos ir jonų iškroviklis. Suspensijos kultūros yra nuo tvirtinimo vietos nepriklausomos kultūros, kuriose ląstelės auga be prisitvirtinančio substrato. Ši kultūra padeda sukurti pavienių ląstelių kultūras, kurios galėtų būti panaudotos tiriant augalų ląsteles, atsižvelgiant į jų skirtingus potencialus ir savybes. Tai yra skirtumas tarp vienasluoksnės kultūros ir suspensijos kultūros.
