Pagrindinis skirtumas tarp pBR322 ir pUC19 yra tas, kad pBR322 yra plazmidės vektorius, kurio ilgis yra 4361 bazių poros, o pUC19 yra plazmidės vektorius, kurio ilgis yra 2686 bazinės poros.
Klonavimo vektorius yra maža DNR dalis, kuri gali būti stabiliai išlaikoma organizme. Tai taip pat nedidelė DNR dalis, į kurią klonavimo tikslais galima įterpti svetimą DNR fragmentą. Vektorius turi svarbių savybių, leidžiančių patogiai įterpti svetimą DNR fragmentą į vektorius, pavyzdžiui, restrikcijos vietos, pasirenkamas žymeklis, reporterio genas ir ekspresijos elementas. Pirmiausia klonavimas buvo atliktas naudojant E.coli. E. coli klonavimo vektoriai yra plazmidės, bakteriofagai, kosmidai ir bakterinės dirbtinės chromosomos (BAC). Dažniausiai naudojami vektoriai yra genetiškai modifikuotos plazmidės. pBR322 ir pUC19 yra dviejų tipų plazmidiniai vektoriai.
Kas yra pBR322?
pBR322 yra plazmidinis vektorius. Tai vienas iš pirmųjų plačiai naudojamų E. coli klonavimo vektorių. Šis vektorius pirmą kartą buvo sukurtas 1977 m. Herbert Boyer laboratorijoje Kalifornijos universitete, San Franciske. Tai apskrita dvigrandė DNR, kurios ilgis yra 4361 bazių poros.
01 pav.: pBR322
Šis plazmidės vektorius turi ypatingų savybių. Paprastai jis turi du atsparumo antibiotikams genus: geną bla, koduojantį atsparumą ampicilinui (AmpR) ir geną tetA, koduojantį atsparumą tetraciklinui (TetR).) b altymas. Be to, jame yra pMB1 replikacijos pradžia. Šis plazmidės vektorius taip pat turi rop geną, kuris koduoja plazmidės kopijų skaičiaus ribotuvą. Be to, šis vektorius turi unikalias restrikcijos vietas daugiau nei 40 restrikcijos fermentų. Vienuolika iš tų keturiasdešimties restrikcijos vietų yra TetR gene. TetR geno promotoriuje yra dvi restrikcijos vietos restrikcijos fermentams HindIII ir ClaI. Be to, geno AmpR yra šešios labai svarbios restrikcijos vietos. pBR322 yra mažo kopijų skaičiaus klonavimo vektorius. Vienoje bakterijos ląstelėje yra maždaug 20 plazmidės kopijų. Vektoriaus molekulinė masė yra 2,83×106 d altonų.
Kas yra pUC19?
pUC19 yra plazmidės vektorius, kurio ilgis yra 2686 bazinės poros. Tai viena iš plazmidinių vektorių serijos, kurią sukūrė Joachimas Messingas ir bendradarbiai. Ankstyvasis darbas su šia plazmidžių serija buvo atliktas Kalifornijos universitete. Tai apskrita dvigrandė DNR.
02 pav.: pUC19
Šis plazmidės vektorius taip pat turi svarbių savybių. Jis turi β-glaktozidazės (lacz) geno N galinį fragmentą. Jis taip pat turi kelių klonavimo vietų (MCS) regioną. Ši sritis yra padalinta į 6 ir 7 lacz geno kodonus. MCS regione yra daug restrikcijos endonukleazių restrikcijos vietų. Be β-glaktozidazės geno, pUC19 taip pat koduoja atsparumo ampicilinui geną (AmpR). Be to, replikacijos pradžia yra iš plazmidės pMB1. Nors pUC19 yra mažo dydžio, jo kopijų skaičius yra didelis (500–700 kopijų vienoje bakterijų ląstelėje). Šio plazmidinio vektoriaus molekulinė masė yra 1,75×106 d altonų.
Kokie yra pBR322 ir pUC19 panašumai?
- pBR322 ir pUC19 yra dviejų tipų plazmidiniai vektoriai.
- Jie yra populiarūs colių klonavimo vektoriai.
- Abu plazmidiniai vektoriai turi tą pačią plazmidės pMB1 replikacijos pradžią.
- Šie vektoriai turi kelias apribojimo vietas.
- Abu plazmidiniai vektoriai turi atsparumo ampicilinui geną kaip pasirenkamą žymenį.
Kuo skiriasi pBR322 ir pUC19?
pBR322 yra plazmidės vektorius, kurio ilgis yra 4361 bazių poros, o pUC19 yra plazmidės vektorius, kurio ilgis yra 2686 bazinės poros. Taigi tai yra pagrindinis skirtumas tarp pBR322 ir pUC19. Be to, pBR322 yra mažo kopijų skaičiaus plazmidės vektorius, o pUC19 yra didelio kopijų skaičiaus plazmidės vektorius.
Toliau pateiktoje infografikoje pateikiami skirtumai tarp pBR322 ir pUC19 lentelės pavidalu, kad būtų galima palyginti.
Santrauka – pBR322 vs pUC19
Dažniausiai naudojami E.coli klonavimo vektoriai yra genetiškai modifikuotos plazmidės.pBR322 ir pUC19 yra dviejų tipų plazmidiniai vektoriai. pBR322 yra plazmidės vektorius, kurio ilgis yra 4361 bazių poros, o pUC19 yra plazmidės vektorius, kurio ilgis yra 2686 bazinės poros. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp pBR322 ir pUC19.
