Pagrindinis skirtumas – DMEM ir EMEM
Gyvūnų ląstelių kultivavimas atliekamas siekiant išlaikyti gyvūnų ląstelių linijas, kad būtų galima atlikti daugybę tyrimų. Gyvūnų ląstelių linijos palaikomos steriliomis sąlygomis ir joms reikia specialių metodų. Jie naudojami atliekant tyrimus, susijusius su vakcinų gamyba, nustatant ląstelės elgesį kancerogenų ir mutagenų atžvilgiu bei atliekant vėžio tyrimus. Ląstelių kultūros terpė yra labai svarbi gyvūnų ląstelių kultūros sėkmei. Yra įvairių tipų ląstelių kultūros terpės, tokios kaip „Dulbecco Modified Eagle Medium“(DMEM) ir „Eagle's Minimum Essential Medium“(EMEM). DMEM yra modifikuota bazinė terpė su padidinta aminorūgščių ir vitaminų koncentracija iki keturių kartų. Tai taip pat apima dar keletą pakeitimų, kurie padidina terpės maistines sąlygas. EMEM yra viena iš pirmųjų gyvūnų ląstelių kultūros terpės tipų, kurią sukūrė Harry Eagle. Tai paprasta bazinė terpė su minimaliais maistinių medžiagų kiekiais. Pagrindinis skirtumas tarp dviejų terpių yra maistinių medžiagų sudėtis. EMEM sudaro minimalios koncentracijos maistinių medžiagų, reikalingų kultūros augimui, o DMEM yra labai sudėtinga terpė su padidinta aminorūgščių ir vitaminų koncentracija.
Kas yra DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) yra modifikuota terpės rūšis, kuri komerciniais tikslais gaminama kaip kreminės b altos spalvos milteliai. Tai pritaikyta iš EMEM, o maistinių medžiagų sudėtis modifikuojama didinant aminorūgščių ir vitaminų koncentraciją. Aminorūgščių koncentracija padidėja iki dviejų kartų, palyginti su bazine terpe. Vitamino koncentracija padidinama iki keturių kartų, taip padidinant maistinių medžiagų kiekį terpėje.
DMEM taip pat modifikuojamas pridedant daugiau druskų, pvz., geležies nitrato, natrio piruvato ir kai kurių nepakeičiamų aminorūgščių, tokių kaip serinas ir glicinas. Taip pat keičiasi ir gliukozės koncentracija terpėje. Pradinė formulė sudaryta iš 1000 mg/l gliukozės, o DMEM koncentracija padidinama iki 4500 mg/l. DMEM taip pat reikia papildyti serumo terpę, nes tai nėra visa terpė. Dažniausiai DMEM papildomas galvijų vaisiaus serumu (FBS). FBS suteikia auginimo procesui reikalingų b altymų ir augimo faktorių.
Terpės pH kinta pridėjus natrio bikarbonato. Terpės pH prieš pridedant natrio bikarbonato yra apie 6,80 – 7,40, o įdėjus natrio bikarbonato pH yra 7,60 – 8,20 intervale. Laikmenų laikymo temperatūra yra 2–8 0C.
01 pav.: DMEM
DMEM programos
- Tirti poliomaviruso gebėjimą formuoti apnašas pelių embrioninėse ląstelėse.
- Atliekant kontakto slopinimo tyrimus
- Viščiukų ląstelių kultūrose
Kas yra EMEM?
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) yra viena iš pirmųjų sukurtų terpių gyvūnų ląstelių linijų ląstelių kultivavimui. Pirmieji gyvūnų ląstelių linijų tipai, auginami naudojant EMEM, yra pelės L ląstelės ir HeLa ląstelės. EMEM laikmena taip pat yra modifikuotų laikmenų rūšis. Harry Eagle pirmą kartą suformulavo EMEM terpę. EMEM terpėje buvo būtinų aminorūgščių ir vitaminų, kurių koncentracija yra minimali, reikalinga ląstelių tipams. Nepakeičiamos aminorūgštys nebuvo įtrauktos į preparatą, o gliukozės ir natrio bikarbonato koncentracija yra sumažinta. Nors terpėje buvo subalansuotas minimalių augimo poreikių kiekis sėkmingam ląstelių augimui.
EMEM nėra visa terpė. Todėl sėkmingam žinduolių ląstelių augimui reikalingas papildymas serumu. EMEM naudojamas įvairioms ląstelėms ir vis dar yra populiari terpė tarp ląstelių kultūros tyrinėtojų.
Kokie yra DMEM ir EMEM panašumai?
- Abu terpės tipai naudojami gyvūnų ląstelių kultūroje.
- Abu terpės tipai yra skystos formos.
- Abu laikmenų tipai yra modifikuotos laikmenos iš bazinės laikmenos.
- Abejų tipų terpėse yra būtinų aminorūgščių, vitaminų ir neorganinių druskų, reikalingų augimui.
- Abu laikmenų tipai neužbaigti. Todėl reikia pridėti serumo.
- Abu terpės tipai naudoja gliukozę kaip anglies š altinį.
- Abiejų tipų terpės pH yra didesnis ir yra reguliuojamas pridedant natrio bikarbonato.
Kuo skiriasi DMEM ir EMEM?
DMEM prieš EMEM |
|
| DMEM yra modifikuoto tipo bazinė terpė su padidinta aminorūgščių ir vitaminų koncentracija. Tai taip pat apima dar keletą pakeitimų, kurie padidina terpės maistines sąlygas. | EMEM yra viena iš pirmųjų gyvūnų ląstelių kultūros terpės tipų, kurią sukūrė Harry Eagle. Tai paprasta bazinė terpė su minimaliais maistinių medžiagų kiekiais. |
| Aminorūgščių modifikacijos | |
| Aminorūgščių koncentracija DMEM terpėje padidėjo iki dviejų kartų. | EMEM naudojama minimali aminorūgščių koncentracija. |
| Vitaminų modifikacijos | |
| Vitaminų koncentracija DMEM padidėjo iki keturių kartų. | EMEM naudojama minimali vitaminų koncentracija. |
| Gliukozės koncentracija | |
| Gliukozės koncentracija DMEM padidėjo iki 4500 mg/l. | Gliukozės koncentracija EMEM yra 1000 mg/l. |
| Neesminių aminorūgščių buvimas | |
| Pateikti DMEM. | Nedalyvauja EMEM. |
| Papildomų komponentų buvimas | |
| DMEM yra tokių komponentų kaip geležies nitratas, natrio piruvatas. | EMEM yra minimalus maistinių medžiagų kiekis. |
Santrauka – DMEM prieš EMEM
DMEM ir EMEM yra dvi populiarios gyvūnų ląstelių kultūros terpės, kurios daugiausia skiriasi savo maistinių medžiagų sudėtimi. DMEM yra modifikuota EMEM forma, kai maistinių medžiagų koncentracija padidinama kartu su kai kuriais naujais komponentais. EMEM yra minimali terpė, kurioje yra visi esminiai veiksniai, reikalingi sėkmingam gyvūnų ląstelių linijų augimui. Šios terpės turi būti naudojamos labai steriliomis sąlygomis, o prieš naudojimą abi terpės turi būti papildytos serumu. Tai yra skirtumas tarp DMEM ir EMEM.
Atsisiųskite DMEM vs EMEM PDF failą
Galite atsisiųsti šio straipsnio PDF versiją ir naudoti ją neprisijungus, kaip nurodyta citatos pastaboje. Atsisiųskite PDF versiją čia Skirtumas tarp DMEM ir EMEM
