Pagrindinis skirtumas – RPMI ir DMEM
Dauguma tyrimų apima gyvūnų ląstelių kultivavimą, todėl šiems tyrimams reikia palaikyti gyvūnų ląstelių linijas ypatingomis augimo sąlygomis. Gyvūnų ląstelių kultivavimas plačiai naudojamas farmakologiniuose tyrimuose, siekiant nustatyti vaistų metabolizmą, ligų diagnostikoje ir vėžio tyrimuose. Ląstelių kultūros terpė yra svarbus gyvūnų ląstelių kultūros aspektas. Dulbecco Modified Eagle Medium (DMEM) ir Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) yra dvi auginimo terpės, naudojamos gyvūnų ląstelėms auginti. RPMI yra terpė, plačiai naudojama žinduolių ląstelėms kultivuoti suspensijos kultūroje. DMEM yra modifikuotas bazinės terpės tipas, kurio aminorūgščių ir vitaminų koncentracija padidėja iki keturių kartų. DMEM naudojamas kultivuojant ląsteles prilipusiose kultūrose. Pagrindinis skirtumas tarp dviejų žiniasklaidos priemonių yra žiniasklaidos kultūros tipas. RPMI naudojamas suspensijos kultūroms, o DMEM naudojamas prilipusioms ląstelėms kultivuoti.
Kas yra RPMI?
RPMI arba Roswell Park Memorial Institute Medium taip pat vadinama RPMI 1640. Žiniasklaidos pavadinimą gavo institutas, kuriame žiniasklaida buvo atrasta. Ši terpė dažniausiai naudojama gyvūnų ląstelių kultūroje, ypač žinduolių ląstelėms auginti. Iš pradžių jie buvo sukurti žmogaus limfocitams auginti.
Šios sudedamosios dalys yra įtrauktos į RPMI.
- Gliukozė
- pH indikatorius (fenolio raudonas)\
- Druskos (natrio chloridas, natrio bikarbonatas, dinatrio fosfatas, kalio chloridas, magnio sulfatas ir kalcio nitratas)
- Aminorūgštys
- Vitaminai (i-inozitolis, cholino chloridas, para-aminobenzenkarboksirūgštis, folio rūgštis, nikotinamidas, piridoksino hidrochloridas, tiamino hidrochloridas, kalcio pantotenatas, biotinas ir riboflavinas, cianokobalaminas)
Ypatinga RPMI savybė yra padidėjusi fosfato koncentracija terpėje. RPMI naudojamas 5% anglies dioksido atmosferoje. Tai sudarys maksimalias ir optimalias sąlygas ląstelėms augti. Bikarbonato buferio sistema palaiko 8,0 terpės pH.
01 pav. Ląstelių kultūra Petri lėkštelėje
RPMI taikymas ląstelių kultivavimui
- Žmogaus T ir B limfocitų, kaulų čiulpų ląstelių ir hibridomos auginimas.
- Naudojamas tiriant žmogaus neoplastines ląsteles.
Kas yra DMEM?
Dulbecco Modified Eagle's Medium (DMEM) yra modifikuota terpė, paruošta komerciniais tikslais. Pradinė vidutinės pudros tekstūra yra geltona. DMEM vitamino koncentracija padidinama iki keturių kartų, taip padidinant maistinių medžiagų kiekį terpėje.
DMEM taip pat modifikuojamas pridedant daugiau druskų, pvz., geležies nitrato, natrio piruvato ir kai kurių nepakeičiamų aminorūgščių, tokių kaip serinas ir glicinas. Taip pat keičiasi ir terpėje esančios gliukozės sudėtis. Pradinė formulė sudaryta iš 1000 mg/l gliukozės, o DMEM koncentracija padidinama iki 4500 mg/l. DMEM taip pat reikia papildyti serumo terpę, nes tai nėra visa terpė. Dažniausiai DMEM papildomas galvijų vaisiaus serumu (FBS). FBS suteikia auginimo procesui reikalingų b altymų ir augimo faktorių.
Terpės pH kinta pridėjus natrio bikarbonato. Terpės pH prieš pridedant natrio bikarbonato yra maždaug 6,80–7,40, o pH įdėjus natrio bikarbonato yra 7,60–8,20 intervale. Terpės laikymo temperatūra yra 2–8 0C.
02 pav.: DMEM
DMEM programos
- Tirti poliomaviruso gebėjimą formuoti apnašas pelių embrioninėse ląstelėse.
- Sąlyčio slopinimo tyrimuose.
- Tiriant ir analizuojant vištų ląstelių kultūras.
Kokie yra RPMI ir DMEM panašumai?
- Tiek RPMI, tiek DMEM naudojami gyvūnų ląstelių kultūroje.
- Tiek RPMI, tiek DMEM terpė yra skystos kompozicijos.
- Tiek RPMI, tiek DMEM terpėse yra augimui reikalingų nepakeičiamų aminorūgščių, vitaminų ir neorganinių druskų.
- Tiek RPMI, tiek DMEM laikmenos neužbaigtos. Todėl reikia pridėti serumo.
- Tiek RPMI, tiek DMEM terpėje kaip anglies š altinis naudojama gliukozė.
- Tiek RPMI, tiek DMEM terpės pH yra didesnis.
Kuo skiriasi RPMI ir DMEM?
RPMI prieš DMEM |
|
| RPMI yra terpė, plačiai naudojama žinduolių ląstelėms kultivuoti suspensijos kultūroje. | DMEM yra modifikuoto tipo bazinė terpė su padidinta aminorūgščių ir vitaminų koncentracija. |
| Papildomų fosfatų buvimas | |
| Pateikti RPMI. | Nėra DMEM. |
| Naudokite | |
|
Naudojamas ląstelėms kultivuoti prilipusiose kultūrose. Įpratusi,
|
| Kultūros tipai | |
| RPMI naudojamas suspensijos kultūroms. | DMEM naudojamas kultūroms su prilipusiomis ląstelėmis. |
Santrauka – RPMI vs DMEM
Tiek RPMI, tiek DMEM plačiai naudojami gyvūnų ląstelių kultivavimui, ypač gyvūnų ląstelių linijoms, įskaitant limfocitus, in vitro kultivuoti. DMEM yra modifikuota bazinė terpė, kurioje yra padidėjusi maistinių medžiagų koncentracija. RPMI, kurį sukūrė Roswell Park Memorial Institute, ir tai taip pat terpė, naudojama gyvūnų ląstelių kultivavimui, ypač žinduolių limfocitams. Abi laikmenos yra parduodamos. Tai yra skirtumas tarp RPMI ir DMEM.
