Pagrindinis skirtumas – inokuliacija ir inkubacija
Mikroorganizmai auginami laboratorijose ir pramonės šakose įvairiais tikslais, pavyzdžiui, apibūdinimui, diferencijavimui, identifikavimui, antibiotikų kūrimui, vakcinų kūrimui, transgeninių (GMO) augalų ir gyvūnų gamybai bei organinių rūgščių ekstrahavimui. Jie auginami dirbtinai susintetintose auginimo terpėse arba natūraliuose substratuose. Todėl reikia paruošti skirtingų tipų sterilias šviežias terpes, o norimi mikroorganizmai kultivuojami grynose arba mišriose kultūrose. Terpės yra papildytos visomis maistinėmis medžiagomis, reikalingomis mikroorganizmo augimui. Mikroorganizmo įvedimas į šviežią terpę arba substratą yra žinomas kaip inokuliacija. Tačiau reikia sudaryti optimalias augimo sąlygas, kad mikroorganizmas augtų pakankamai. Procesas, užtikrinantis reikiamas augimo sąlygas, pvz., temperatūrą, drėgmę ir pH, ir leisti mikroorganizmams augti terpėje, vadinamas inkubavimu. Taigi pagrindinis skirtumas tarp inokuliacijos ir inkubacijos yra tas, kad inokuliacija yra mikroorganizmų įvedimas į auginimo terpę arba substratą, o inkubacija leidžia mikroorganizmams augti tiekiamose augimo sąlygose.
Kas yra skiepijimas?
Skiepijimas – tai mikroorganizmų įterpimo į jiems augti tinkamą auginimo terpę procesas. Kitaip tariant, inokuliacija gali būti apibrėžta kaip procesas, kurio metu patogeninis arba antigeninis mikroorganizmas įvedamas į gyvą organizmą, siekiant paskatinti antikūnų gamybą. Užbaigus inokuliaciją, mikroorganizmai pradeda augti ir daugintis terpėje, sudarydami matomas kolonijas.
Mikrobiologijoje naudojami įvairių tipų skiepijimo įrankiai ir metodai. Laboratorijose dažniausiai naudojamos skiepijimo kilpos, skiepijimo adata, medvilniniai tamponai, žnyplės, stikliniai prederiai, dozatoriaus pipetės. Visos šios medžiagos turi būti be teršalų. Todėl prieš inokuliavimą būtina juos sterilizuoti naudojant tinkamą sterilizavimo metodą, kad būtų išvengta užteršimo ar nepageidaujamų mikroorganizmų augimo terpėje. Dėvintosios plokštelės metodas, paskleidimo vietos metodas, užpylimo plokštelės metodas, taškinė inokuliacija, dūrinė kultūra, pasvirusi kultūra yra keli inokuliavimo būdai, naudojami mikrobų laboratorijose bakterijoms ir grybeliams auginti.
01 pav. Bakterijų inokuliacija naudojant juostelių plokštelės metodą
Kas yra inkubacija?
Mikroorganizmai turi skirtingus auginimo poreikius. Jie turi būti aprūpinti reikalingomis maistinėmis medžiagomis, vandeniu, mineralais, augimo faktoriais, mikroelementais ir kitomis augimo sąlygomis. Pasėjus mikrobą į šviežią terpę, reikia palaikyti augimo sąlygas, kad būtų palaikomas mikroorganizmo augimas. Procesas, leidžiantis mikroorganizmams augti terpėje, sudarant būtinas augimo sąlygas, vadinamas inkubavimu. Inokuliuotos kultūros plokštelės gali būti dedamos į prietaisą, vadinamą inkubatoriumi, kad būtų galima inkubuoti. Inkubatoriai suprojektuoti taip, kad operatorius galėtų kontroliuoti temperatūrą, drėgmę, dujų koncentraciją ir tt pagal mikrobų reikalavimus.
Kokios yra mikrobų augimo fazės?
Kai sudaromos optimalios sąlygos, mikroorganizmai linkę augti, daugintis ir daugintis, naudojant terpėje esančias maistines medžiagas. Mikrobų augimas kultūrinėje terpėje turi keturias skirtingas fazes. Po inokuliacijos jie pradeda vėlavimo fazę. Vėlavimo fazės metu mikrobai nerodo spartaus augimo ar dauginimosi. Jie pradeda prisitaikyti prie naujos aplinkos ir ten stabilizuojasi. Jas sureguliavus, prasideda antroji fazė, rodanti eksponentinį mikroorganizmo augimą. Antroji fazė yra žinoma kaip log fazė arba eksponentinė fazė. Log fazės metu mikrobai rodo optimalų augimo ir dauginimosi greitį. Trečioji fazė prasideda po log fazės, kai maistinių medžiagų ir kitų poreikių kiekis terpėje yra ribotas. Stacionarios fazės metu augimo ir žūties greitis tampa lygus, o augimo kreivė yra tiesi linija, lygiagreti x ašiai. Ketvirta fazė yra mirties fazė, kai mirtingumas viršija augimo tempą. Po kelių dienų mikrobų dauginimasis sustoja, paliekant negyvą kultūrą.
02 pav. Mikrobų plokštelių inkubatorius
Kuo skiriasi inokuliacija ir inkubacija?
Inokuliacija prieš inkubaciją |
|
| Sėjimas yra mikroorganizmų arba mikroorganizmų suspensijos įterpimo į auginimo terpę procesas. | Inkubacija – tai procesas, leidžiantis užkrėstiems mikroorganizmams augti reikiamomis augimo sąlygomis. |
| Naudoti įrankiai | |
| Skiepyti galima naudojant skiepijimo adatas, skiepijimo kilpas, vatos pakaitalus, pipetes ir kt. | Inkubacija gali būti atliekama kultūros kambaryje, inkubatoriuje, kultūros stovuose ir kt. |
| Laikas | |
| Skiepijimas atliekamas per trumpą laiką. | Inkubacija trunka nuo kelių valandų iki dienų. |
| Sąlygos išlaikytos | |
| Inokuliacija atliekama aseptinėmis sąlygomis laminarinėje oro spintoje. | Inkubacija atliekama užtikrinant tinkamas augimo sąlygas, pvz., temperatūrą, drėgmę, deguonies koncentraciją, šviesą ir kt. |
Santrauka – inokuliacija prieš inkubaciją
Sėjimas ir inkubavimas yra du pagrindiniai mikroorganizmų auginimo laboratorijose žingsniai. Inokuliacija – tai mikroorganizmo įvedimas į tinkamą auginimo terpę arba substratą. Inokuliuotoms terpėms sudaromos tinkamos augimo sąlygos augti ir daugintis. Šis procesas žinomas kaip inkubacija. Tai yra pagrindinis skirtumas tarp inokuliacijos ir inkubacijos. Mikrobų laboratorijose yra specialių įrankių ir įrangos inkubavimo tikslams. Inkubatorius yra įtaisas, leidžiantis mikroorganizmams augti esant kontroliuojamai temperatūrai, aeracijai, drėgmei ir pan. Inokuliacija ir inkubacija turi būti atliekama laikantis tinkamų aseptinių sąlygų, kad būtų išvengta užteršimo ir laiko švaistymo.
Atsisiųsti PDF versijos skiepą prieš inkubaciją
Galite atsisiųsti šio straipsnio PDF versiją ir naudoti ją neprisijungus, kaip nurodyta citatų pastabose. Atsisiųskite PDF versiją čia Skirtumas tarp inokuliacijos ir inkubacijos.
