Pagrindinis skirtumas tarp genų amplifikacijos ir genų klonavimo yra tas, kad genų amplifikacija yra daugelio dominančio geno kopijų gamybos procesas in vitro polimerazės grandininės reakcijos būdu. Tačiau genų klonavimas yra daugelio dominančio geno kopijų gamybos procesas in vivo, sukuriant rekombinantinę plazmidę ir paverčiant ją bakterija šeimininke.
A genas yra specifinis DNR fragmentas, koduojantis b altymą. Organizmas turi tūkstančius genų. Be to, naudojant molekulinės biologijos metodus galima padauginti svarbių genų DNR sekas. Genų amplifikacija ir genų klonavimas yra dvi tokios procedūros. Abi procedūros sukuria daug dominančio geno kopijų. Tačiau tarp genų amplifikacijos ir genų klonavimo skiriasi jų metodika.
Kas yra genų amplifikacija?
Genų amplifikacija yra tam tikro geno kopijų kūrimo procesas naudojant polimerazės grandininę reakciją. Norint amplifikuoti geną, to konkretaus organizmo DNR turėtų būti išskirta naudojant tinkamą DNR ekstrahavimo protokolą. Tada išskirtą dvigrandę DNR reikia denatūruoti, kad būtų gautos atskirtos vienos grandinės. Kitas žingsnis apima PGR reakcijos naudojimą, norint padaryti dominančio geno kopijas. Be to, PGR mišinyje yra reikiamų pradmenų, nukleotidų, DNR polimerazės fermento, šablono DNR ir kitų ingredientų. Pasibaigus KLR programai, vyksta dominančio geno amplifikacija.
01 pav.: Genų amplifikacija
Be to, genų amplifikacija yra pradinis žingsnis nustatant konkrečią seką, identifikuojant organizmą, diagnozuojant ligas ir kuriant genų bibliotekas ir kt.
Kas yra genų klonavimas?
Genų klonavimas yra genų inžinerijos metodas, skirtas sukurti genų bibliotekas arba daug dominančio geno kopijų. Šis procesas apima rekombinantinės plazmidės pagaminimą ir rekombinantinės plazmidės transformavimą į ląstelę šeimininką, ypač į bakterinę ląstelę. Klonas yra identiška pirminio organizmo arba molekulės kopija. Genų klonavimas gali sukurti tūkstančius genų klonų.
02 pav.: Genų klonavimas
Nustačius dominantį geną, jį galima atskirti nuo konkretaus organizmo genomo, apribojant jį specifiniais restrikcijos fermentais. Tada naudojant tą patį restrikcijos fermentą reikia atidaryti plazmides (vektorius), kad būtų įterptas geno fragmentas. Tada rekombinantinė plazmidė transformuojama į šeimininko bakteriją, naudojant įvairius metodus, tokius kaip elektroporacija. Kai kurios rekombinantinės plazmidės patenka į šeimininko bakterijų ląsteles. Naudojant antibiotiką transformuotos bakterijos gali būti atrenkamos, išskiriamos ir auginamos šviežioje terpėje. Taigi šis metodas padeda gauti milijonus genų klonų.
Kokie yra genų amplifikacijos ir genų klonavimo panašumai?
- Genų amplifikacija ir genų klonavimas yra du molekulinės biologijos metodai.
- Taikant abu šiuos metodus, tam tikra DNR seka arba genas padaugėja milijonus ar tūkstančius kartų.
- Be to, abu metodai yra nepaprastai svarbūs daugeliui mokslo sričių.
Kuo skiriasi genų amplifikacija ir genų klonavimas?
Genų amplifikacija yra procesas, kurio metu daromos konkretaus geno kopijos naudojant in vitro metodą, vadinamą PGR. Kita vertus, genų klonavimas yra procesas, kurio metu konkretaus geno kopijos daromos naudojant in vivo metodą, konstruojant rekombinantinius vektorius ir dauginant juos gyvame organizme. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp genų amplifikacijos ir genų klonavimo. Be to, genų amplifikacija trunka tik kelias valandas, o genų klonavimas trunka kelias dienas. Todėl tai taip pat galime laikyti skirtumu tarp genų amplifikacijos ir genų klonavimo. Be to, genų amplifikacijos procesas rodo mažiau klaidų, o genų klonavimo procesas rodo daugiau klaidų.
Toliau pateikta infografija apibendrina skirtumą tarp genų amplifikacijos ir genų klonavimo.
Santrauka – genų amplifikacija prieš genų klonavimą
Genų amplifikacija – tai norimo geno kopijų kūrimo procesas naudojant polimerazės grandininę reakciją in vitro sąlygomis, o genų klonavimas – tai dominančio geno kopijų darymas naudojant rekombinantinę DNR molekulę ir gyvą organizmą/šeimininką. bakterija. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp genų amplifikacijos ir genų klonavimo.
