Pagrindinis skirtumas tarp Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimo yra tas, kad Bradfordo b altymų tyrimas pagrįstas Coomassie briliantinio mėlynojo G-250 absorbcijos poslinkiu, o Lowry b altymų tyrimas pagrįstas vario jonų (Cu+) jonų reakcija. susidaro oksiduojant peptidines jungtis Folin-Cioc alteu reagentu.
Tyrimas yra analizės metodas, padedantis apibūdinti pagrindinius funkcinius mėginio komponentus. Taigi, tyrimas gali būti tiek kokybinis, tiek kiekybinis. Daugelis sričių, įskaitant laboratorinę mediciną, farmakologiją, aplinkos biologiją, molekulinę biologiją, biochemiją ir imunologiją, reguliariai naudoja tokius tyrimus. Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimas yra du biocheminiai tyrimai, kuriais nustatoma b altymų koncentracija mėginio tirpale. Abiejuose tyrimuose rezultatams gauti naudojami kolorimetriniai metodai.
Kas yra Bradfordo b altymų tyrimas?
Bradfordo b altymų tyrimas yra greita spektroskopinė b altymų analizės procedūra. Tai rodo didelį tikslumą matuojant b altymų koncentraciją tirpale. Marion Bradford pristatė šią procedūrą 1976 m. Šiame tyrime bendra reakcija pagrįsta išmatuotų b altymų aminorūgščių sudėtimi. Kitaip tariant, Bradfordo b altymų tyrimas yra kolorimetrinis tyrimas. Jis naudoja Coomassie briliantinio mėlynumo dažus. Taigi šis kolorimetrinis b altymų tyrimas priklauso nuo dažų absorbcijos poslinkio. Coomassie briliantinis mėlynas G-250 yra trijų formatų: katijoninis (raudonas), anijoninis (mėlynas) ir neutralus (žalias). Esant rūgštinėms sąlygoms, raudona dažų forma paverčiama mėlyna. Tai patvirtina b altymų prisijungimą. Jei b altymų nėra, tirpalas gali likti rudos spalvos.
01 pav.: Bradfordo b altymų tyrimas
Bradfordo b altymų tyrimas skiriasi nuo kitų b altymų tyrimų, nes yra mažiau jautrus įvairių b altymų tirpale esančių cheminių junginių trukdžiams. Šie junginiai yra natris, kalis, gliukozė, sacharozė ir kt.
Kas yra Lowry b altymų tyrimas?
Lowry b altymų tyrimas yra biocheminis tyrimas, naudojamas bendram b altymų kiekiui tirpale nustatyti. Oliveris H. Lowry yra asmuo, kuris 1940 m. sukūrė šį reagentą. Procedūra vaizduoja bendrą b altymų koncentraciją tirpale spalvos pasikeitimu, kuris yra proporcingas b altymų koncentracijai tirpale. Taigi tai taip pat yra kolorimetrinis b altymų tyrimas.
Šios procedūros pagrindas yra reakcija tarp vario jonų (Cu+), susidarančių oksiduojantis peptidinėms jungtims, ir Folin-Cioc alteu reagento. Taip pat šiame reagente yra fosfomolibdo rūgšties ir fosforo-volframo rūgšties. Tačiau Lowry b altymų tyrimo reakcijos mechanizmas nėra gerai suprantamas. Tačiau tai apima cisteino, triptofano ir tirozino likučių oksidaciją redukuojant Folin-Cioc alteu reagentą.
02 pav. Lowry b altymų tyrimas
Cisteino likučiai prisideda prie absorbcijos, stebimos Lowry b altymų tyrime, o reakcijos rezultatas – ryškiai mėlyna molekulė; heteropolio molibdeno mėlyna. Šios molekulės redukcija matuojama absorbcija prie 660 nm. Taigi, cisteino ir triptofano likučių koncentracija, redukavusi Folin-Cioc alteu reagentą, lemia bendrą b altymo koncentraciją tirpale.
Kokie yra Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimo panašumai?
- Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimai nustato b altymų koncentraciją tirpale.
- Abu metodai yra kolorimetriniai.
- Be to, abiejų metodų jautrumas yra didelis.
Kuo skiriasi Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimas?
Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimas yra dviejų tipų tyrimai, kuriais nustatoma b altymų koncentracija tirpale. Bradfordo b altymų tyrimas priklauso nuo Coomassie briliantinio mėlynojo G-250 absorbcijos poslinkio, o Lowry b altymų tyrimas priklauso nuo vario jonų, susidarančių oksiduojant peptidines jungtis, reakcijos su Folin-Cioc alteu reagentu. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimo. Bradfordo b altymų tyrimas užtrunka 15 minučių, kol gaunamas rezultatas, o Lowery b altymų tyrimas užtrunka 40–60 minučių. Taigi tai yra dar vienas skirtumas tarp Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimo. Be to, Bradfordo b altymų tyrimas priklauso nuo aminorūgščių sudėties, o Lowry b altymų tyrimas iš dalies priklauso nuo aminorūgščių sudėties. Taigi tai taip pat skiriasi tarp Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimo.
Toliau pateikta informacija apie skirtumą tarp Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimo.
Santrauka – Bradfordo vs Lowry b altymų tyrimas
Tyrimas yra analizės metodas, naudojamas pagrindiniam funkciniam mėginio komponentui apibūdinti. Bradfordo ir Lowry b altymų tyrimas yra dviejų tipų b altymų tyrimai, kurie veikia taikant kolorimetrinius metodus. Tiek Bradfordo, tiek Lowry b altymų tyrimai nustato b altymų koncentraciją tirpale. Tačiau pagrindinis skirtumas tarp „Bradford“ir „Lowry Protein Assay“yra jų naudojama kolorimetrinė technika. Bradfordo b altymų tyrime naudojamas Coomassie briliantinis mėlynasis G-250, o Lowry b altymų tyrime naudojami vario jonų (Cu+) jonai ir Folin-Cioc alteu reagentas. Be to, Bradfordo metodas suteikia greitesnius rezultatus nei Lowry b altymų tyrimas. Tačiau abu metodai yra labai jautrūs metodai ir juos trikdo įvairios medžiagos.
