Pagrindinis skirtumas tarp DNR ir RNR išskyrimo yra tas, kad DNR išskyrimas yra procedūra, kai iš biologinės ląstelės išgaunama tam tikros rūšies nukleorūgštis, vadinama DNR, o RNR išskyrimas yra procedūra, kurios metu išskiriama tam tikros rūšies nukleorūgštis, vadinama RNR. išgauta iš biologinės ląstelės.
Nukleino rūgščių išskyrimas yra daugelio tolesnių programų pradžios taškas. Aukšta nukleino rūgščių kokybė pradiniuose mėginiuose yra pagrindinis veiksnys, lemiantis tolesnių paskesnių pritaikymų sėkmę. Nukleino rūgščių išskyrimą galima apibrėžti kaip žingsnių seriją, siekiant gauti nukleino rūgštį gryname mėginyje, kuris gali būti naudojamas įvairiems tolesnio naudojimo etapams. Nukleino rūgščių ekstrahavimo tikslas – suardyti ląstelės membraną ir pasiekti maksimalų lipidų bei b altymų pašalinimą, kad būtų gautos grynos nukleino rūgštys, tokios kaip DNR arba RNR.
Kas yra DNR izoliacija?
DNR išskyrimas yra įprasta procedūra, kai iš biologinės ląstelės išgaunama tam tikros rūšies nukleorūgštis, vadinama DNR. DNR išskyrimas atliekamas ekstrahuojant DNR iš kraujo, šaldytų audinių mėginių ir parafininių audinių blokų. Yra trys pagrindiniai DNR išskyrimo etapai, įskaitant ląstelių lizę, DNR išskyrimą ir nusodinimą. Ląstelių lizės metu mėginio ląstelės dažnai atskiriamos viena nuo kitos fizinėmis priemonėmis, tokiomis kaip šlifavimas arba maišymas, ir supilamos į tirpalą, kuriame yra druskos. Paprastai teigiamai įkrauti natrio jonai druskoje padeda apsaugoti neigiamai įkrautas fosfatų grupes, kurios eina palei DNR stuburą. Vėliau įdedama ploviklio, kuris suskaido ląstelės membranoje ir branduoliuose esančius lipidus, kurie, suardant šias membranas, išskiria DNR.
01 pav.: DNR išskyrimas
DNR ekstrahavimas atliekamas norint gauti švarų DNR mėginį. Dažnai pridedamas proteazės fermentas, kad suskaidytų su DNR susijusius b altymus ir kitus ląstelių b altymus. Be to, kai kurias ląstelių šiukšles galima pašalinti filtruojant mėginį. Galiausiai DNR nusodinama naudojant alkoholį. Be to, jei yra daug DNR, procedūros pabaigoje galima pastebėti niūrias b altas nuosėdas.
Kas yra RNR izoliacija?
RNR išskyrimas yra procedūra, kai iš biologinės ląstelės išgaunama tam tikros rūšies nukleorūgštis, vadinama RNR. Šią procedūrą dažnai apsunkina ribonukleazės fermentų buvimas ląstelėse ir audiniuose, kurie skaido RNR. Molekulinėje biologijoje naudojami keli metodai RNR išskyrimui iš mėginių, pavyzdžiui, guanidinio-tiocianato-fenolio-chloroformo ekstrakcija.
02 pav.: RNR išskyrimas
RNR išskyrimas paprastai susideda iš kelių etapų, įskaitant ląstelių lizę ir homogenizavimą, biocheminių procesų gesinimą, nukleorūgščių padalijimą, RNR paėmimą, neapdorotą gryninimą ir RNR kokybės įvertinimą. Filtravimo popieriumi pagrįstas lizės ir eliuavimo metodas pasižymi dideliu RNR ekstrahavimo pralaidumu. Be to, RNR ekstrahavimas skystu azotu naudojant grūstuvą taip pat yra labai naudingas metodas, nes jis apsaugo nuo ribonukleazės aktyvumo.
Kokie yra DNR ir RNR išskyrimo panašumai?
- DNR ir RNR išskyrimas yra dviejų tipų nukleorūgščių išskyrimo procedūros.
- Abiejų procedūrų pagrindiniai žingsniai yra panašūs, pvz., ląstelių lizė, ekstrahavimas ir gryninimas.
- Šiomis procedūromis išskiriami svarbūs nukleino rūgščių tipai, kurie gali būti naudojami daug vėliau.
- Jos atliekamos laboratorijoje.
- Jos gali būti atliekamos naudojant pagamintus rinkinius.
Kuo skiriasi DNR ir RNR išskyrimas?
Atliekant DNR izoliaciją, iš biologinės ląstelės išskiriama tam tikros rūšies nukleorūgštis, vadinama DNR, o išskiriant RNR, iš biologinės ląstelės išgaunama tam tikros rūšies nukleorūgštis, vadinama RNR. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp DNR ir RNR išskyrimo. Be to, DNR išskyrimas paprastai atliekamas esant maždaug 7–8 pH, o RNR išskyrimas paprastai atliekamas esant maždaug pH 4,5.
Toliau pateiktoje infografikoje pateikiami skirtumai tarp DNR ir RNR išskyrimo lentelės pavidalu, kad būtų galima palyginti.
Santrauka – DNR vs RNR izoliacija
DNR ir RNR išskyrimas yra dviejų tipų nukleorūgščių išskyrimo procedūros. DNR išskyrimas – tai procedūra, kurios metu DNR išgaunama iš biologinės ląstelės. RNR išskyrimas – tai procedūra, kurios metu iš biologinės ląstelės išgaunama RNR. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp DNR ir RNR išskyrimo.
