Pagrindinis skirtumas tarp bendro ląstelių skaičiaus ir gyvybingų ląstelių skaičiaus yra tas, kad bendras ląstelių skaičius įvertina visas ląsteles, įskaitant gyvas ir negyvas mikrobų ląsteles mėginyje, o gyvybingų ląstelių skaičius įvertina tik gyvų mikrobų ląsteles mėginyje.
Skaičiuoti organizmų skaičių populiacijoje yra būtina daugeliui eksperimentinių darbų. Todėl bandome analizuoti mikrobų skaičių mėginyje tiesioginiais ir netiesioginiais metodais. Tiesioginiai matavimai apima metodus, kurie tiesiogiai skaičiuoja ląstelių skaičių. Netiesioginiai matavimai apima kai kurių parametrų, kurie gali būti susiję su ląstelių skaičiumi, matavimą, pvz., ląstelių tankį, sausą svorį ir kt. Kai kurie metodai kiekybiškai įvertina tik gyvų mikrobų ląsteles mėginyje. Vienas iš tokių metodų yra gyvybingų ląstelių skaičius. Tiesioginiai mikroskopiniai skaičiavimai mikroskopu nustato visas ląsteles, esančias žinomame terpės / mėginio tūryje. Todėl jis skaičiuoja ir gyvas, ir negyvas ląsteles. Tai yra bendro ląstelių skaičiaus tipas.
Kas yra bendras ląstelių skaičius?
Bendras ląstelių skaičius – tai metodas, apimantis visų žinomo terpės / mėginio tūrio ląstelių skaičiavimą naudojant mikroskopą ir skaičiavimo kamerą (hemocitometrą). Skirtingai nuo gyvybingų ląstelių skaičiaus, skaičiuojamos ir gyvos, ir negyvos ląstelės. Todėl tai yra bendras skaičius, nebent stebėjimo metu užtepamas gyvybingumo dėmelis. Mikroskopijoje ląstelės stebimos tiesiai po mikroskopu ir skaičiuojamos. Jame naudojama ląstelių suspensija, kurią sudaro mikrobinės ląstelės. Kad būtų lengviau skaičiuoti ir atlikti tikslius matavimus, mėginį galima praskiesti. Esant labai didelėms / mažoms ląstelių koncentracijoms, nustatyti bendrą ląstelių skaičių naudojant mikroskopą yra sudėtinga užduotis.
01 pav. Skaičiavimo kamera – hemocitometras
Skaičiavimo kameros yra paprastos, nebrangios ir greitai nustato bendrą ląstelių skaičių. Svarbiausia, kad skaičiavimo kameros yra naudingos skaičiuojant ir eukariotus, ir prokariotus. Skaičiuojame ląsteles pasirinktuose žinomo tūrio kvadratuose, kad įvertintume bendrą ląstelių skaičių.
Kas yra gyvybingų ląstelių skaičius?
Gyvybingų ląstelių skaičius yra gyvų mikrobų ląstelių skaičiavimo mėginyje metodas. Jis skaičiuoja tik gyvas ląsteles mėginyje. Gyvybingų ląstelių skaičius, membraninis filtravimas ir labiausiai tikėtinas skaičius yra keletas gyvybingų ląstelių skaičiavimo metodų. Šie metodai yra pagrįsti augimu. Gyvybingų plokštelių skaičiavimo metodas yra galingas metodas, naudojamas daugelyje mikrobiologijos sričių, įskaitant maisto ir pieno mikrobiologiją, medicininę mikrobiologiją, aplinkos mikrobiologiją, mikrobų genetiką, augimo terpės kūrimą ir biotechnologijas.
Dažniausias būdas suskaičiuoti gyvybingas bakterijas yra naudoti mėginį, galintį suformuoti kolonijas agaro terpėje. Yra du pagrindiniai lėkščių skaičiavimo būdai: paskleidimo lėkštės technika ir lėkštės išpylimo technika. Žinomą mėginio tūrį galima paskleisti ant agaro plokštelės paviršiaus arba įmaišyti į agarą. Tada plokštelė inkubuojama ir skaičiuojamos susidariusios kolonijos. Kolonijų skaičius yra susijęs su mikroorganizmų skaičiumi pradiniame mėginyje. Gyvybingų ląstelių skaičius matuoja tik tas ląsteles, kurios yra gyvos ir auga.
02 paveikslas: gyvybingų plokštelių skaičius
Labiausiai tikėtinas skaičius (MPN) yra alternatyva plokštelių skaičiavimo metodams gyvybingų ląstelių populiacijos tankiui įvertinti. Jis skaičiuoja organizmus, augančius skystoje kultūroje, todėl yra daugiausia bakteriologinis metodas. Tai ypač naudinga esant mažoms organizmų koncentracijoms, pvz. pienas, geriamas vanduo.
Membraninio filtravimo technika labiau tinka, kai mikrobai yra labai atskiesti, kaip miesto vandentiekyje. Tai atliekama tiesiog praleidžiant žinomą skysčio tūrį per filtrą ir inkubuojant jį maistinėje terpėje. Skaičiuojamos ant filtro susiformavusios kolonijos ir apskaičiuojamas bakterijų kiekis viename mėginio mililitre.
Kokie yra bendro ląstelių skaičiaus ir gyvybingų ląstelių skaičiaus panašumai?
- Bendras ląstelių skaičius ir gyvybingų ląstelių skaičius yra dviejų tipų mikrobų metodai, kuriais nustatomas ląstelių kiekis.
- Jie yra dažniausiai naudojami surašymo metodai mikrobiologijos laboratorijose.
Kuo skiriasi bendras ląstelių skaičius ir gyvybingų ląstelių skaičius?
Bendras ląstelių skaičius apima visas gyvas ir negyvas mikrobų ląsteles mėginyje. Priešingai, gyvybingų ląstelių skaičius išvardija tik gyvas ląsteles mėginyje. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp bendro ląstelių skaičiaus ir gyvybingų ląstelių skaičiaus. Bendras ląstelių skaičius nepriklauso nuo kolonijų augimo agaro lėkštelėse, o gyvybingų ląstelių skaičius yra augimu pagrįstas metodas ir priklauso nuo mikrobų kolonijų augimo agaro lėkštelėse.
Toliau pateiktame informaciniame grafike apibendrinamas skirtumas tarp bendro ląstelių skaičiaus ir gyvybingų ląstelių skaičiaus.
Santrauka – bendras ląstelių skaičius ir gyvybingų ląstelių skaičius
Bendras ląstelių skaičius apima gyvas ir negyvas mikrobų ląsteles, o gyvybingų ląstelių skaičius – tik gyvas ląsteles. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp bendro ląstelių skaičiaus ir gyvybingų ląstelių skaičiaus. Be to, gyvybingų ląstelių skaičius yra augimu pagrįstas metodas, skirtingai nei bendras ląstelių skaičius. Be to, norint gauti matomų kolonijų, reikia inkubuoti plokšteles. Gyvybingų plokštelių skaičiavimas, MPN ir membraninis filtravimas yra keletas gyvybingų ląstelių skaičiaus nustatymo būdų, o tiesioginė mikroskopija ir hemocitometro naudojimas yra du bendro ląstelių skaičiaus nustatymo būdai.
