Pagrindinis skirtumas tarp afininės ir jonų mainų chromatografijos yra tas, kad galime naudoti afininę chromatografiją, kad atskirtume įkrautus arba neįkrautus mišinio komponentus, o jonų mainų chromatografiją galime naudoti įkrautiems mišinio komponentams atskirti.
Chromatografija yra metodas, kurį galime naudoti norint atskirti norimus mišinio komponentus. Yra įvairių tipų, tokių kaip skysčių chromatografija, dujų chromatografija ir kt. Afininė chromatografija ir jonų mainų chromatografija yra dvi skysčių chromatografijos subkategorijos. Be to, šiose technikose yra du etapai. Būtent, jie yra stacionari fazė ir mobilioji fazė. Šių metodų tikslas – atskirti komponentus, priklausomai nuo komponentų surišimo, judriojoje fazėje ant stacionarios fazės paviršiaus.
Kas yra giminingoji chromatografija?
Giminė chromatografija yra biocheminis metodas, kurį naudojame atskirti mišinio komponentus, priklausomai nuo šių komponentų sąveikos.
Šiuo atveju naudojamos sąveikos yra šios:
- Antigeno ir antikūnų sąveika
- Fermento ir substrato sąveika
- Receptorių ir ligandų sąveika
- B altymų ir nukleorūgščių sąveika
Šioje atskyrimo technikoje mes naudojame molekulines molekulių savybes. Čia mes leidžiame norimam junginiui sąveikauti su nejudančia faze per vandenilio ryšį, joninę sąveiką, disulfidinius tiltelius, hidrofobinę sąveiką ir kt. Molekulės, kurios nesąveikauja su nejudančia faze, išsiskirs pirmiausia. Taigi galime jį atskirti nuo mišinio. Norimas junginys liks prijungtas prie nejudančios fazės. Todėl galime jį atskirti naudodami eliuavimo tirpiklį ir priversti jį išsiskirti, kad taip pat atskirtų.
01 pav.: Chromatografinė stulpelis
Giminė chromatografija yra naudinga išgryninant ir koncentruojant medžiagą iš mišinio naudojant buferinį tirpalą. Be to, tai padeda sumažinti nepageidaujamų medžiagų mišinyje. Svarstydami aparatą, kurį naudojame šiam procesui, turėtume naudoti kolonėlę, užpildytą stacionaria faze. Tada turėtume įkelti mobiliąją fazę, kurioje yra biomolekulės, kurias ketiname atskirti. Tada leiskite jiems susieti su nejudančia faze. Po to, naudodami plovimo buferį, galime atskirti netikslines biomolekules, tačiau tikslinės molekulės turi turėti didelį afinitetą stacionariai fazei, kad atskyrimo procesas būtų sėkmingas.
Kas yra jonų mainų chromatografija?
Jonų chromatografija yra skysčių chromatografijos forma, kurią naudojant galime analizuoti jonines medžiagas. Dažnai mes jį naudojame analizuodami neorganinius anijonus ir katijonus (ty chlorido ir nitratų anijonus ir kalio, natrio katijonus). Nors tai rečiau, galime analizuoti ir organinius jonus. Be to, mes galime naudoti šį metodą b altymų gryninimui, nes b altymai yra įkrautos molekulės esant tam tikroms pH vertėms. Čia mes naudojame kietą stacionarią fazę, prie kurios gali prisijungti įkrautos dalelės. Pavyzdžiui, kaip kietą atramą galime naudoti dervos polistireno-divinilbenzeno kopolimerus.
02 pav.: Jonų mainų chromatografijos fazės
Norint tai paaiškinti toliau, nejudančioje fazėje yra fiksuotų jonų, tokių kaip sulfato anijonai arba ketvirtiniai aminų katijonai. Kiekvienas iš jų turėtų susieti su priešingu (priešingo krūvio jonu), jei norime išlaikyti šios sistemos neutralumą. Čia, jei priešionas yra katijonas, tada sistemą pavadiname katijonų mainų derva. Bet jei priešionas yra anijonas, sistema yra anijonų mainų derva.
Yra penkios pagrindinės jonų mainų proceso fazės;
- Pradinis etapas
- Taikinio adsorbcija
- Eluavimo pradžia
- Eluavimo pabaiga
- Regeneracija
Kuo skiriasi afinitetinė ir jonų mainų chromatografija?
Giminė chromatografija yra biocheminis metodas, kurį naudojame mišinio komponentams atskirti, atsižvelgiant į šių komponentų sąveiką, o jonų chromatografija yra skysčių chromatografijos forma, kurią naudojant galime analizuoti jonines medžiagas. Todėl pagrindinis skirtumas tarp afininės ir jonų mainų chromatografijos yra tas, kad jonų mainų chromatografiją galime naudoti tik joninėms medžiagoms atskirti, o afininė chromatografija gali atskirti ir įkrautas, ir neįkrautas daleles. Atsižvelgiant į veikimo principą, skirtumas tarp afininės ir jonų mainų chromatografijos yra tas, kad afinitetinė chromatografija vyksta dėl to, kad tikslinės molekulės turi didelį afinitetą stacionariai fazei. Tačiau atliekant jonų mainų chromatografiją, tikslinės molekulės turi priešingą krūvį stacionarios fazės paviršiaus krūviui.
Toliau pateiktoje infografijoje pateikiamas skirtumas tarp afiniteto ir jonų mainų chromatografijos kaip vienas kito palyginimas.
Santrauka – afinitetas prieš jonų mainų chromatografiją
Apibendrinant galima pasakyti, kad afininė ir jonų mainų chromatografija yra dvi skysčių chromatografijos metodų formos. Pagrindinis skirtumas tarp afininės ir jonų mainų chromatografijos yra tas, kad mes galime naudoti afininę chromatografiją, kad atskirtume įkrautus arba neįkrautus mišinio komponentus, o jonų mainų chromatografiją galime naudoti įkrautiems mišinio komponentams atskirti.
