Pagrindinis skirtumas – Gram Stain vs Culture
Dažymas gramais yra dažymo metodas, kuris atliekamas siekiant suskirstyti bakterijas į dvi grupes pagal jų ląstelės sienelės peptidoglikano sluoksnio storį. Kultūra yra mikroorganizmų auginimo ir palaikymo laboratorinėmis sąlygomis metodas įvairioms analizėms atlikti. Pagrindinis skirtumas tarp gramų dėmės ir kultūros yra jų funkcija; gram štamas – bakterijų dažymo metodas, kur kultūra yra mikroorganizmų auginimo ir palaikymo metodas.
Kas yra „Gram Stain“?
Gramų dažymas yra svarbus diferencinio dažymo metodas, naudojamas bakterijoms identifikuoti mikrobiologijoje. Šį metodą 1884 m. pristatė danų bakteriologas Hansas Christianas Gramas. Gram dažymas suskirsto bakterijas į dvi dideles grupes: gramteigiamas ir gramneigiamas; tai labai svarbu klasifikuojant ir identifikuojant bakterijas. Dažymas gramais atliekamas kaip pradinis bakterijų apibūdinimo etapas.
Bakterijos grupuojamos pagal jų ląstelės sienelės skirtumus. Gramteigiamų bakterijų ląstelės sienelėje yra storas peptidoglikano sluoksnis, o gramneigiamų bakterijų ląstelės sienelėje yra plonas peptidoglikano sluoksnis, kaip parodyta 01 paveiksle. Gramteigiamų bakterijų dažymo rezultatas bus pagrįstas peptidoglikano sluoksnio storio skirtumu. ląstelės sienelė.
1 pav. Gramteigiamos ir gramneigiamos bakterijos
Gramų dažymas atliekamas naudojant keturis skirtingus reagentus, būtent; pirminis beicas, kandiklis, spalvą mažinantis agentas ir priešingas beicas. Krištolinė violetinė ir safraninas yra atitinkamai pagrindinės ir priešingos dėmės, o gramai jodo ir 95 % alkoholio yra atitinkamai ėsdiklis ir baliklis.
Pagrindiniai gramų dėmių pašalinimo žingsniai
- Bakterijų tepinėlis paruošiamas ant švaraus stiklelio, fiksuojamas termiškai ir atšaldomas.
- Tepinėlis 1–2 minutes užliejamas krištoliniu violetiniu.
- Tepinėlis nuplaunamas lėtai tekančiu vandeniu iš čiaupo, kad būtų pašalintos dėmės.
- Ant tepinėlio 1 minutę užtepama gramų jodo.
- Tepinėlis nuplaunamas lėtai tekančiu vandeniu iš čiaupo
- Tepinėlis plaunamas 95 % alkoholiu 2–5 sekundes ir nuplaunamas lėtai tekančiu vandeniu iš čiaupo.
- Tepinėlis 1 minutę nudažomas safraninu
- Tepinėlis nuplaunamas lėtai tekančiu vandeniu iš čiaupo, išdžiovinamas ir stebimas po mikroskopu.
Gramų dėmės pabaigoje gramneigiamos bakterijos bus stebimos rausvos spalvos, o gramteigiamos bakterijos bus violetinės spalvos, kaip parodyta 02 paveiksle. peptidoglikano sluoksnio jų ląstelės sienelėje. Spalvos šalinimo metu pirminė dėmė ir kandiklis lengvai pašalinami iš gramneigiamų bakterijų ir tampa bespalviai, nes turi ploną peptidoglikano sluoksnį. Pirminė dėmė išlieka gramteigiamose bakterijose, nes jos turi storą peptidoglikano sluoksnį. Priešinis dažymas nebus veiksmingas gramteigiamoms bakterijoms, nes išliks pirminė dėme. Taigi gramteigiamos bakterijos bus matomos pirminės dėmės spalva, t. y. purpurine spalva. Priešdėmės nudažo gramneigiamas bakterijas ir bus matomos pasirinktos spalvos, kuri yra safranino spalva. Taigi pagal gramų dėmę lengva suskirstyti bakterijas į dvi grupes ir tai yra vertinga diferencijuojant ir identifikuojant bakterijas.
2 pav. Gramo padermė
Kas yra kultūra?
Mikrobų kultūra – tai mikroorganizmų kultivavimo ir palaikymo būdas laboratorinėmis sąlygomis įvairiems tikslams. Kultūros auginamos kietoje, pusiau kietoje ir skystoje terpėje, atsižvelgiant į mikroorganizmo auginimo tipą ir tikslą. Kultūros aprūpinamos būtinomis maistinėmis medžiagomis ir mikroorganizmams reikalingomis augimo sąlygomis. Yra įvairių auginimo terpės komponentų, tokių kaip energijos š altinis, anglies š altinis, azoto š altinis, mineralai, mikroelementai, vanduo, kietiklis ir kt. Optimali temperatūra, deguonis ir pH turi būti koreguojami atsižvelgiant į auginamo mikroorganizmo tipą.
Yra įvairių mikrobų kultūrų tipų; pavyzdžiui, paketinė kultūra, nepertraukiama kultūra, dūrinė kultūra, agaro lėkštelių kultūra, sultinio kultūra ir kt. Atsižvelgiant į auginimo terpės sudėtį, yra įvairių tipų auginimo terpės, žinomos kaip sintetinės, pusiau sintetinės ir natūralios terpės. Mikrobų kultūros ruošiamos steriliomis sąlygomis specialioje kameroje, vadinamoje laminariniu oro srautu. Auginimo terpė ir stikliniai indai sterilizuojami prieš sėjant norimą mikroorganizmą. Tinkamomis steriliomis sąlygomis tikslinis mikroorganizmas perkeliamas į sterilizuotą maistinę terpę ir inkubuojamas optimalioje temperatūroje. Terpės viduje mikroorganizmas augs ir dauginsis naudodamas maistines medžiagas.
3 pav. Bakterijų kultūra lėkštelėje
Kuo skiriasi Gram Stain ir Culture?
Gram Stain vs Culture |
|
| Grams padermė yra diferencinio dažymo metodas, naudojamas bakterijoms diferencijuoti ir identifikuoti. | Mikrobų kultūra yra mikroorganizmų auginimo laboratorijoje metodas. |
| Komponentai | |
| Naudojami skirtingi reagentai, įskaitant du dėmes. | Naudojamos skirtingos auginimo terpės, pvz., kietos, pusiau kietos ir skystos terpės, sudarytos iš maistinių medžiagų ir kitos būtinos sąlygos. |
| Pagrindinės funkcijos | |
| Tai leidžia sugrupuoti bakterijas į dvi grupes: gramneigiamas ir gramteigiamas. | Tai leidžia daugintis mikroorganizmams įvairiems tikslams. |
| Base | |
| Gramo dažymo rezultatas pagrįstas ląstelės sienelės peptidoglikano sluoksnio skirtumais. | Mikroorganizmai augs ir dauginsis auginimo terpėje. |
| Rezultatas | |
| Gramneigiamos bakterijos matomos rausva spalva, o gramteigiamos bakterijos matomos purpurine spalva. | Lėkštelėse matomos mikroorganizmų kolonijos. Skystoje terpėje mikroorganizmai yra suspenduoti. |
Santrauka – Gram Stain vs Culture
Mikrobų kultūros ruošiamos ir palaikomos laboratorinėmis sąlygomis įvairiems tikslams, pvz., saugojimui, tyrimams, cheminiam valymui ir tt. Grams dažymas yra dažymo procedūra, kuri išskiria bakterijas į dvi pagrindines grupes, vadinamas gramneigiamomis ir gramteigiamomis bakterijomis. Todėl skirtumas tarp gramų dažymo ir kultūros yra tas, kad gramų dažymas yra bakterijų dažymo būdas, o kultūra yra mikroorganizmų auginimo ir palaikymo laboratorijose metodas.
