Pagrindinis skirtumas – pirminė ląstelių kultūra ir ląstelių linija
Tyrimų sritis smarkiai pasikeitė pradėjus auginti ląsteles ir naudoti ląstelių linijas tyrimams. Skirtingi bandymai atliekami su dirbtinai paruoštomis ląstelėmis ir ląstelių linijomis, siekiant įvertinti ląstelės elgseną. Daugeliui žmonių atliekamų tyrimų reikia ląstelių kultivavimo ir ląstelių linijų, kad būtų patvirtinti rezultatai, ypač kai moksliniai tyrimai yra pagrįsti farmakologija ir vaistų atradimu. Pirminė ląstelių kultūra yra kultūra, paruošta tiesiogiai išskiriant ląsteles mechaniniais arba fermentiniais metodais. Ląstelių linija paruošiama nuolat perduodant pirminę ląstelių kultūrą, kad būtų gauta ląstelių linija, kuri įgijo homologinius požymius. Pagrindinis skirtumas tarp pirminės ląstelių kultūros ir ląstelių linijos yra praėjimo kartų skaičius, kurį kiekviena iš jų turi. Pirminė ląstelių kultūra yra išskiriama tiesiogiai, o ląstelių linija paruošiama kelis kartus perduodant pirminę ląstelių kultūrą.
Kas yra pirminė ląstelių kultūra?
Pirminė ląstelių kultūra yra ląstelių kultūros preparatas, išskiriant ląsteles tiesiai iš š altinio mechaniniais arba fermentiniais metodais. Ląstelės išskiriamos tripsinizacijos arba netripsinizacijos metodais. Pirminės ląstelių kultūros auginamos tinkamoje augimo terpėje, kurioje yra augimo faktorių, hormonų, lipidų ir kitų neapibrėžtų komponentų. Tam tikros terpės turi būti su serumu. Terpė užtikrina optimalias augimo sąlygas, o ląstelės išgyvena optimaliomis sąlygomis. Ląstelės gali būti išskirtos iš skirtingų audinių š altinių, pvz., kepenų audinio, endotelio ir nervinio audinio žmonėms arba aukštesniems gyvūnams naudojant tripsinizaciją.
Išskiriant ląsteles iš augalų ir mikroorganizmų, naudojamos specialios ekstrahavimo procedūros, kuriose naudojami tiek mechaniniai, tiek cheminiai metodai. Šios izoliuotos ląstelės gali būti imobilizuojamos ant kietos atramos arba gali būti perduodamos kelioms kartoms, kad jos išsivystytų į ląstelių liniją.
Pirminės ląstelių kultūros daugiausia yra dviejų tipų; Prilipusios ląstelių kultūros ir suspensijos ląstelių kultūros. Prilipusios pirminės ląstelių kultūros priklauso nuo tvirtinimo vietos ir joms augti reikalinga tvirta atrama. Prilipusios pirminės ląstelių kultūros daugiausia gaunamos iš audinių arba organų. Suspensijos pirminės ląstelių kultūros nepriklauso nuo tvirtinimo vietos ir auga skystoje terpėje. Suspensijos kultūros augimo fazės metu turi būti nuolat maišomos. Suspensijos pirminės ląstelių kultūros gali būti tiesiogiai gautos iš kraujo.
Pirminių ląstelių kultūrų gyvenimo trukmė yra santykinai trumpesnė, tačiau informacija, gauta iš pirminių ląstelių kultūrų in vitro sąlygomis, yra daugelio tyrimų pagrindas. Jie naudingi tiriant ląstelių charakteristikas, tiek morfologinę, tiek cheminę elgseną.
Kas yra ląstelių linija?
Ląstelių linijos plačiai naudojamos moksliniams tyrimams, o šiuo metu tokių ląstelių linijos kaip vėžio ląstelių linijos, kepenų ląstelių linijos ir inkstų ląstelių linijos yra parduodamos mokslinių tyrimų tikslais. Ląstelių linijos paruošiamos nuolat perduodant pirminę ląstelių kultūrą. Perdavimas reiškia subkultūros procesą, kai ląstelių kultūros sukuriamos į ląstelių liniją. Šios ląstelių linijos yra kultūros dvimatėse arba trimatėse matricose ir palaikomos kaip ląstelių linijos.
Ląstelių linijos klasifikuojamos kaip baigtinės ir ištisinės ląstelių linijos. Ribinės ląstelių linijos yra perduotos tam tikram skaičiui (20–30 pasažų). Atlikus reikiamą pasažų skaičių, ląstelių linija patenka į senėjimo stadiją. Šios ląstelės yra lengvai valdomos, nes jų augimas yra neabejotinas. Ištisinės ląstelių linijos taip pat vadinamos įamžintomis ląstelių linijomis. Šios ląstelių linijos neturi tam tikro pasažų skaičiaus. Jie auga neribotą laiką ir todėl gali įgyti mutacijų. Todėl ištisinės ląstelių linijos lengvai mutuoja, todėl keičiasi jų morfologinės ir genetinės savybės, skirtingai nei baigtinių ląstelių linijų.
01 pav.: ląstelių linija
Ląstelių linijos naudojamos, nes tai yra patogiau nei naudoti pirminę ląstelių kultūrą, nes ją galima naudoti vėl ir vėl tam tikrą laikotarpį. Tačiau ji yra labiau linkusi į mutacijas ir užterštumą, nes didėja jų dauginimasis.
Kokie yra pirminės ląstelių kultūros ir ląstelių linijos panašumai?
- Ląstelių kultūros ir ląstelių linijos tipų ląstelės naudojamos morfologinėms, cheminėms ir genetinėms ląstelės savybėms tirti.
- Tiek ląstelių kultūros, tiek ląstelių linijos tipo ląstelės ekstrahuojamos mechaniniais ir fermentiniais metodais.
- Tiek ląstelių kultūros, tiek ląstelių linijos tipų ląstelėms reikia auginimo terpės ir specifinių augimo sąlygų.
- Tiek ląstelių kultūros, tiek ląstelių linijos tipų ląstelės yra linkusios į mutacijas.
Kuo skiriasi pirminė ląstelių kultūra ir ląstelių linija?
Pirminė ląstelių kultūra prieš ląstelių liniją |
|
| Pirminė ląstelių kultūra yra kultūra, paruošta tiesiogiai išskiriant ląsteles mechaniniais arba fermentiniais metodais. | Ląstelių linija paruošiama nuolat perduodant pirminę ląstelių kultūrą, kad būtų gauta ląstelių linija, kuri įgavo homologinius požymius. |
| Ištraukų skaičius | |
| Pirminės ląstelių kultūros nėra paskirstomos, ląstelės palaikomos kultivavimo sąlygomis. | Ląstelės yra paskirstomos neabejotinai arba neribotą laiką kuriant ląstelių linijas. |
| Typai | |
| Prilipusi pirminė ląstelių kultūra ir suspensinė pirminė ląstelių kultūra yra dviejų tipų pirminės ląstelių kultūros. | Baigtinė ląstelių linija ir ištisinė ląstelių linija yra dviejų tipų ląstelių linijos. |
| Gyvenimo trukmė | |
| Pirminių ląstelių kultūrų gyvenimo trukmė yra trumpa. | Ląstelių linijų eksploatavimo trukmė ilgesnė. |
Santrauka – pirminė ląstelių kultūra prieš ląstelių liniją
Pirminės ląstelių kultūros ir ląstelių linijos plačiai naudojamos moksliniams tyrimams tirti skirtingų ląstelių elgsenos modelius skirtingomis sąlygomis ir skirtingais farmakologiniais aspektais. Pirminės ląstelių kultūros yra tiesiogiai išskiriamos iš š altinio organo arba audinio ir auginamos auginimo terpėje. Sąlygos yra optimizuotos specifinių ląstelių augimui. Ląstelių linijos, priešingai, paruošiamos praeinant pirmines ląstelių kultūras baigtinį arba begalinį skaičių kartų. Ląstelių linijos yra parduodamos ir yra populiarios tarp tyrėjų dėl naudojimo paprastumo.
