Pagrindinis skirtumas tarp klonavimo vektoriaus ir ekspresijos vektoriaus yra tas, kad klonavimo vektorius perneša svetimą DNR fragmentą į šeimininko ląstelę, o ekspresijos vektorius palengvina genų ekspresiją į b altymus.
Vektorius yra svarbus terminas molekulinėje biologijoje. Taikant rekombinantinės DNR technologiją, pagrindinis vektoriaus vaidmuo yra užtikrinti transportavimo būdą į naudingą DNR frakciją, kuri bus įterpta į ląstelę šeimininką. Be to, tai yra DNR molekulė, naudojama svetimam DNR fragmentui dirbtinai pernešti į ląstelę-šeimininkę, kad ji būtų ekspresuojama arba replikuojama. Dažniausiai naudojami vektoriai yra plazmidės, virusiniai vektoriai, kosmidai ir dirbtinės chromosomos. Klonavimo vektorius ir ekspresijos vektorius yra dviejų tipų vektoriai, klasifikuojami pagal jų pritaikymą.
Kas yra klonavimo vektorius?
Klonavimo vektorius yra DNR dalis, kuri gali būti naudojama svetimai DNR molekulei įterpti ir gali būti įterpta į šeimininką klonavimo tikslais. Ideali klonavimo vektoriaus savybė yra lengvas DNR fragmento įterpimas / pašalinimas naudojant restrikcijos fermentą ir ligavimo fermentą. Šiuo aspektu dažnai naudojami klonavimo vektoriai yra genetiškai modifikuotos plazmidės.
01 pav.: Klonavimo vektorius
Klonavimo vektorius turi turėti daugybinę klonavimo vietą, pasirenkamą žymeklio geną ir reporterio geną. Klonavimo vietos paskirtis – suteikti vietą klonavimui. Atrenkamas žymeklio genas padeda identifikuoti sėkmingus rekombinantus po klonavimo, o reporterio genas leidžia atrinkti ir nustatyti teisingą rekombinantą tarp rekombinantų po klonavimo. Klonavimo vektorius nebūtinai padeda ekspresuoti b altymą, kurį koduoja svetima DNR. Taigi, vienintelis klonavimo vektoriaus tikslas yra pernešti svetimą DNR į šeimininką.
Kas yra išraiškos vektorius?
Ekspresijos vektorius, dar vadinamas ekspresijos konstruktu, yra vektorius, naudojamas b altymams ekspresuoti ląstelės šeimininkės viduje. Kaip ir bet kuris vektorius, jo pagrindinės dalys turėtų būti daugybinė klonavimo vieta, žymeklio genas ir reporterio genas. Vektorius įveda naują geną į šeimininką ir, naudodamas šeimininko b altymų sintezės mechanizmą, leidžia geną ekspresuoti šeimininke. Be to, pradinis jo tikslas yra sukurti stabilią m-RNR ir taip gaminti b altymus. Vienas geras pavyzdys yra komercinė insulino gamyba. Insulino genas įvedamas į bakterijų plazmidę ir įterpiamas atgal į E.coli bakterijų kūną, leidžiantį plazmidėms daugintis ir E. coli augti, išskiriant insuliną, kurį galima surinkti ir naudoti.
02 pav.: išraiškos vektorius
Be to, ekspresijos vektorius turi turėti stiprią promotoriaus sritį, teisingą transliacijos inicijavimo seką ir teisingą terminatoriaus kodoną bei seką. Ekspresijos vektoriai turi daug pritaikymų gaminant peptidus ir b altymus farmacijos pramonei, pavyzdžiui, gaminant insuliną, augimo hormoną, antibiotikus, vakcinas, antikūnus. Be to, ekspresijos vektoriai padeda gaminti fermentus maisto ir drabužių pramonėje. Negana to, ekspresijos vektoriai yra būtini auginant transgeninius augalus, tokius kaip auksiniai ryžiai, vabzdžiams atsparūs augalai, herbicidams atsparūs augalai ir kt.
Kokie yra klonavimo vektoriaus ir išraiškos vektoriaus panašumai?
- Klonavimo vektorius ir ekspresijos vektorius yra dviejų tipų vektoriai, kuriuos naudojame rekombinantinėje DNR technologijoje ir genų inžinerijoje.
- Abu turi žymeklio geną ir reporterio geną.
- Be to, jas sudaro kelios klonavimo vietos.
- Be to, jie turi replikacijos pradžią ir galimybę savarankiškai daugintis.
Kuo skiriasi klonavimo vektorius ir išraiškos vektorius?
Klonavimo vektorius yra maža DNR molekulė, pernešanti svetimą DNR fragmentą į šeimininko ląstelę, o ekspresijos vektorius yra vektoriaus tipas, palengvinantis genų įvedimą, ekspresiją ir b altymų gamybą. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp klonavimo vektoriaus ir ekspresijos vektoriaus. Be to, dar vienas reikšmingas skirtumas tarp klonavimo vektoriaus ir ekspresijos vektoriaus yra tas, kad klonavimo vektorius įveda svetimą DNR fragmentą į šeimininką, o ekspresijos vektoriai ekspresuoja įvestą geną gamindami atitinkamą b altymą.
Be to, klonavimo vektorius susideda iš replikacijos pradžios, restrikcijos vietų ir pasirenkamo žymeklio. Nors ekspresijos vektorius turi stiprintuvus, promotoriaus sritį, terminacijos kodoną, transkripcijos inicijavimo seką, replikacijos pradžią, restrikcijos vietas ir pasirenkamą žymeklį. Todėl tai taip pat yra skirtumas tarp klonavimo vektoriaus ir ekspresijos vektoriaus. Be to, klonavimo vektorių pavyzdžiai yra plazmidės, bakteriofagai, bakterijų dirbtinės chromosomos, kosmidai, dirbtinės žinduolių chromosomos, mielių dirbtinės chromosomos ir kt. Tuo tarpu ekspresijos vektoriai dažniausiai yra plazmidės.
Santrauka – Klonavimo vektorius ir išraiškos vektorius
Remiantis jų funkcija molekulinėje biologijoje, yra dviejų tipų vektoriai: klonavimo vektorius ir ekspresijos vektorius. Klonavimo vektorius yra maža DNR molekulė, kuri pristato svetimą DNR į šeimininko ląstelę. Yra įvairių tipų klonavimo vektorių, tokių kaip plazmidės, bakteriofagai, bakterinės dirbtinės chromosomos, kosmidai ir dirbtinės žinduolių chromosomos. Priešingai, ekspresijos vektorius yra plazmidė, kuri įveda dominantį geną į šeimininko ląstelę ir palengvina geno ekspresiją, kad būtų gautas b altyminis produktas. Ekspresijos vektoriai yra plazmidės. Taigi, tai yra skirtumo tarp klonavimo vektoriaus ir ekspresijos vektoriaus santrauka.
