Pagrindinis skirtumas tarp HPLC ir UPLC yra tas, kad HPLC leidžia analizuoti daleles, kurių dydis yra apie 5 mikrometrus, o UPLC leidžia analizuoti daug mažesnes, maždaug 2 mikrometrų daleles.
HPLC ir UPLC yra skysčių chromatografijos metodai, naudingi atskiriant junginio komponentus. Norėdami sužinoti skirtumą tarp HPLC ir UPLC, pirmiausia turime žinoti, kas yra HPLC. Taip yra todėl, kad UPLC yra speciali HPLC versija, kurią galime lengvai suprasti, jei žinome, kas yra HPLC.
Kas yra HPLC?
Terminas HPLC reiškia didelio efektyvumo skysčių chromatografiją. Tai metodas, kurį galime naudoti norėdami atskirti skirtingas junginio sudedamąsias dalis. Be to, tai yra plačiausiai naudojamas būdas nustatyti, kiekybiškai įvertinti ir atskirti mišinio komponentus. Be to, ši technika naudoja aukštą slėgį, kad tirpikliai išstumtų per kolonėlę. Be to, pagrindiniai HPLC pritaikymai yra biochemija, skirta junginio sudedamųjų dalių analizei. Tai idealus būdas atskirti ir identifikuoti aminorūgštis, nukleino rūgštis, b altymus, angliavandenilius, pesticidus, angliavandenius, antibiotikus, steroidus ir daugybę kitų neorganinių medžiagų.
01 pav.: HPLC sistema laboratorijoje
Trumpai tariant, HPLC technikos veikimo metodas yra toks. Pirma, mes turėtume įnešti mėginį į judriosios fazės srautą atskirais mažais kiekiais naudodami siurblį. Siurblio slėgis turi būti palaikomas 40 MPa. Tada šis judriosios fazės srautas prasiskverbia per HPLC kolonėlę. Be to, mėginyje esantys komponentai praeina per kolonėlę. Tačiau jų judėjimo greitis skiriasi vienas nuo kito. Šis skirtumas atsiranda dėl skirtingos sąveikos tarp mėginio komponentų ir adsorbento kolonėlės viduje. Šį adsorbentą vadiname nejudančia faze, nes jis yra kolonėlės viduje (nejuda). Antra, kolonėlės pabaigoje galime surinkti mėginį, kuris išsiplauna iš kolonėlės. Čia galime nustatyti kiekvieno mėginio komponento sulaikymo laiko skirtumus.
Kas yra UPLC?
Terminas UPLC reiškia itin didelio efektyvumo skysčių chromatografiją. Tai HPLC variantas, tačiau veikimo būdas yra tas pats. Tačiau skirtingai nei HPLC, šis metodas leidžia analizuoti labai mažas daleles, pvz., 2 mikrometrų mažas daleles.
02 pav.: UPLC įrenginys
Be to, ji suteikia greitesnę analizę. Taikant šį metodą, mes naudojame 100 MPa siurblio slėgį mėginiui įterpti į kolonėlę. Taigi šis aukštas slėgis patvirtina, kad visas mėginys įvedamas į kolonėlę. Taigi, tai yra labai efektyvu, palyginti su HPLC.
Kuo skiriasi HPLC ir UPLC?
Sąvoka HPLC reiškia didelio efektyvumo skysčių chromatografiją, o terminas UPLC reiškia ypač didelio efektyvumo skysčių chromatografiją. Todėl UPLC technika yra sukurta HPLC versija. Taigi abiejų technikų veikimo būdas yra vienodas. Tačiau UPLC yra efektyvesnis, palyginti su HPLC, nes naudojamas didelis siurblio slėgis; siurblio slėgis HPLC yra 40 MPa, o UPLC - 100 MPa. Todėl tai yra skirtumas tarp HPLC ir UPLC. Svarbiausia, kad pagrindinis skirtumas tarp HPLC ir UPLC yra tas, kad HPLC leidžia analizuoti daleles, kurių dydis yra apie 5 mikrometrus, o UPLC leidžia analizuoti daug mažesnes, maždaug 2 mikrometrų daleles.
Santrauka – HPLC vs UPLC
UPLC yra HPLC forma. Taigi, operacijos metodai yra vienodi. Tačiau, palyginti su HPLC, galime rasti keletą patobulintų UPLC funkcijų. Todėl yra tam tikras skirtumas tarp HPLC ir UPLC. Tačiau pagrindinis skirtumas tarp HPLC ir UPLC yra tas, kad HPLC leidžia analizuoti daleles, kurių dydis yra apie 5 mikrometrus, o UPLC leidžia analizuoti daug mažesnes, maždaug 2 mikrometrų daleles.
