Pagrindinis skirtumas tarp HPLC ir greitojo HPLC yra tas, kad siurblio slėgis, kurį naudojame HPLC, yra apie 40 MPa, o siurblio slėgis greitam HPLC yra apie 3–5 MPa.
Dažniausia technika, kurią naudojame mišinio komponentams atskirti, yra „skysčių chromatografija“. Yra keletas būdų, kaip pasiekti šį tikslą, iš kurių HPLC yra labai populiarus. HPLC reiškia didelio efektyvumo skysčių chromatografiją, kuri greitai ir efektyviai identifikuoja, kiekybiškai įvertina ir atskiria skysto mišinio komponentus. Greitas HPLC yra specialus HPLC taikymas, kuris pastaruoju metu patraukė tų, kurie dalyvauja tiriant tirpalus, dėmesį.
Kas yra HPLC?
HPLC yra didelio efektyvumo skysčių chromatografija. Jis naudoja aukštą slėgį, kad stumtų tirpiklius taip, kad jie praeitų per kolonėlę. Be to, tai idealus būdas atskirti ir tirti įvairius junginius, tokius kaip aminorūgštys, nukleino rūgštys, angliavandeniai, steroidai, antibiotikai ir angliavandeniliai. HPLC turi daug pranašumų, palyginti su kitais mišinių atskyrimo metodais, pvz., didesnė skiriamoji geba ir greitesnė analizė. Tai panaikina perpakavimo ir regeneravimo poreikį ir siūlo geresnę parametrų kontrolę ir taip padidina atskyrimo efektyvumą. Idealiu atveju HPLC tinka didelio masto naudojimui, nes gali atskirti labai mažas daleles ir leidžia naudoti aukštą slėgį, dėl kurio tirpikliai lengvai tekėja.
01 pav.: HPLC stulpelis
Trumpai tariant, HPLC technikos veikimo metodas yra toks. Pirmiausia, naudodami siurblį, turėtume įnešti mėginį į judriosios fazės srautą atskirais mažais kiekiais. Siurblio slėgis turi būti palaikomas 40 MPa. Šis judriosios fazės srautas prasiskverbia per HPLC kolonėlę. Tada mėginyje esantys komponentai taip pat praeina per kolonėlę. Tačiau jų judėjimo greitis skiriasi vienas nuo kito, nes skiriasi mėginio komponentų ir adsorbento sąveika kolonėlės viduje. Šį adsorbentą vadiname nejudančia faze, nes jis yra kolonėlės viduje (nejuda). Tada kolonėlės pabaigoje galime surinkti mėginį, kuris išsiplauna iš kolonėlės, taigi galime atskirai surinkti mėginio komponentus.
Kas yra greitasis HPLC?
Neseniai Schering Plow tyrimų instituto mokslininkai sukūrė greitojo HPLC metodą, kuris yra pažangi HPLC versija, nes ji leidžia dar greičiau atskirti junginius nuo mišinio. Taip pat žinomas kaip greitas HPLC, šis metodas naudoja 2,7 um lydyto šerdies silicio dioksido daleles, kurios gaunamos sulydant 0,5 um porėtą silicio dioksidą su kietomis silicio dioksido dalelėmis. Dėl šių unikaliai pagamintų dalelių atskyrimo procedūra labai greita, o priešslėgis yra mažesnis nei naudojamas HPLC.
02 pav.: FPLC aparatas
Greitas HPLC duoda rezultatus, palyginamus su UPLC, tačiau mokslininkai mano, kad ši technika yra pranašesnė, nes jai nereikia labai brangios itin aukšto slėgio įrangos. Puiku yra tai, kad greitam HPLC nereikia jokių naujų laboratorinių protokolų.
Koks skirtumas tarp HPLC ir greitojo HPLC?
HPLC yra didelio efektyvumo skysčių chromatografija, o greitoji HPLC yra pažangi didelio efektyvumo skysčių chromatografijos forma. Pagrindinis skirtumas tarp HPLC ir greitojo HPLC yra tas, kad siurblio slėgis, kurį naudojame HPLC, yra apie 40 MPa. Tuo tarpu siurblio slėgis greitam HPLC yra apie 3–5 MPa. Be to, naudodami HPLC techniką galime atskirti įvairius junginius, tokius kaip aminorūgštys, nukleino rūgštys, angliavandeniai, steroidai, antibiotikai ir angliavandeniliai, o greitasis HPLC metodas daugiausia naudojamas b altymams atskirti.
Toliau pateiktame infografike pateikiama daugiau informacijos apie skirtumą tarp HPLC ir greitojo HPLC.
Santrauka – HPLC prieš greitą HPLC
HPLC yra skysčių chromatografijos technika, kuri tapo labai populiari visame pasaulyje. Greitas HPLC yra nauja HPLC versija, Schering Plow instituto mokslininkai sukūrė šią naują techniką. Pagrindinis skirtumas tarp HPLC ir greitojo HPLC priklauso nuo siurblio slėgio, kurį naudojame atskyrimui. Tai yra; siurblio slėgis, kurį naudojame HPLC, yra apie 40 MPa. Tačiau greito HPLC siurblio slėgis yra apie 3–5 MPa.
