Pagrindinis skirtumas tarp atvirkštinės fazės ir normalios fazės HPLC yra tas, kad atvirkštinės fazės HPLC naudojama nepoliarinė stacionari fazė ir polinė judri fazė, o normalios fazės HPLC naudoja polinę stacionarią ir mažiau polinę judriąją fazę.
Normalios fazės HPLC yra seniausias HPLC metodas, kurį Tswettas naudojo atskirdamas augalų ekstraktus; jis panaudojo kreidą stiklinėje kolonoje. Tai buvo klasikinis chromatografijos būdas, dėl kurio jis buvo pavadintas „normalia“technika. Kita vertus, atvirkštinės fazės HPLC yra priešinga įprastai technologijai, kurią mokslininkai sukūrė pastaruoju metu.
Kas yra atvirkštinės fazės HPLC?
Atvirkštinės fazės HPLC yra chromatografijos metodas, kai naudojame hidrofobinę stacionarią fazę. Iš visų HPLC metodų šį metodą naudojame maždaug 70 % dėl jo plataus pritaikomumo ir atkuriamumo. Stacionarioji fazė yra nepolinė, o judrioji – polinė.
Dažniausiai mokslininkai kaip judriąją fazę naudoja vandeninį vandens mišinį su besimaišančiu poliniu organiniu tirpikliu, pvz., acetonitrilu arba metanoliu. Todėl analitės sąveikauja su nepoline stacionaria faze.
Kas yra normalios fazės HPLC?
Normalios fazės HPLC yra chromatografijos metodas, kai naudojame hidrofilinę stacionarią fazę. Tai tradicinis HPLC metodas, nors mes jo nenaudojame tiek daug. Stacionarioji fazė yra polinė, o judrioji fazė yra nepolinė. Dar svarbiau, kad šios technikos mobilioji fazė yra 100 % organinė. Tai reiškia, kad tam nenaudojamas vanduo.
01 pav. Mėginio profilis normalios fazės ir atvirkštinės fazės HPLC chromatogramoms pagal analitės komponentų poliškumą.
Paprastai nejudančioje fazėje yra silicio dioksido, ciano, diolio, amino jungčių fazės ir tt Mobiliosios fazės apima organinius tirpiklius, tokius kaip heksanas, etilo acetatas ir kt. Šis metodas pagrįstas tirpiklio arba analitės molekulių sulaikymu ant paviršiaus. polinė stacionari fazė.
Kuo skiriasi atvirkštinės fazės ir normaliosios fazės HPLC?
Atvirkštinės fazės HPLC yra chromatografijos metodas, kai naudojame hidrofobinę stacionarią fazę. Stacionari šio metodo fazė yra nepolinė, o judrioji fazė yra polinė. Be to, atvirkštinės fazės HPLC kaip judriąją fazę mokslininkai naudoja vandeninį vandens mišinį su besimaišančiu poliniu organiniu tirpikliu, pvz., acetonitrilu arba metanoliu. Priešingai, normalios fazės HPLC yra chromatografijos metodas, kuriame naudojame hidrofilinę stacionarią fazę. Šio metodo stacionari fazė yra polinė, o judrioji fazė yra nepolinė. Be to, kaip normalios fazės HPLC judriąją fazę mokslininkai naudoja organinius tirpiklius, tokius kaip heksanas, etilo acetatas ir kt. Žemiau esančioje infografikoje lentelės forma pateikiamas skirtumas tarp atvirkštinės fazės ir normalios fazės HPLC.
Santrauka – atvirkštinės fazės ir normalios fazės HPLC
Atvirkštinės fazės ir normalios fazės HPLC metodai yra du skysčių chromatografijos metodai. Pagrindinis skirtumas tarp atvirkštinės fazės ir normalios fazės HPLC yra tas, kad atvirkštinės fazės HPLC naudoja nepoliarinę stacionarią fazę ir polinę judriąją fazę, o normalios fazės HPLC naudoja polinę stacionarią ir mažiau polinę judriąją fazę.
