Pagrindinis skirtumas – imunocitochemija ir imunohistochemija
Imunocitochemija (ICC) ir imunohistochemija (IHC) yra du plačiai naudojami molekulinės diagnostikos metodai, kuriais remiantis ląstelėse esančiais molekuliniais žymenimis nustatomas ir patvirtinamas tiek neužkrečiamųjų, tiek užkrečiamųjų ligų atsiradimas. Pagrindinis imunocitochemijos ir imunohistochemijos skirtumas yra molekulė, kuri naudojama kaip šių metodų analizės procedūra. ICC naudojami pirminiai ir antriniai antikūnai, konjuguoti su žymenimis, tokiais kaip fluorescencija, o IHC, monokloniniai ir polikloniniai antikūnai naudojami diagnostiniams tyrimams.
Kas yra imunocitochemija (ICC)?
ICC naudoja pirminius ir antrinius antikūnus, sujungtus su žymenimis, pvz., fluorescenciniais žymenimis arba fermentais, ir yra galingas aptikimo metodas, leidžiantis aptikti tikslinėse ląstelėse esančius antigenus, kurie gali būti infekcinės ląstelių dalelės arba vėžinės naviko ląstelės. Imunocitochemijai reikalingi trijų tipų kontroliniai elementai.
- Pirminis antikūnas – kontrolė, rodanti pirminio antikūno, prisijungiančio prie antigeno, specifiškumą
- Antrinis antikūnas – kontrolė, rodanti, kad etiketė būdinga pirminiam antikūnui
- Etiketės valdikliai – parodykite, kad ženklinimas yra pridėtos etiketės, o ne endogeninio ženklinimo rezultatas.
01 pav. Imunocitochemija žymi atskirus b altymus ląstelėse (čia simpatinių autonominių neuronų aksonuose esanti tirozino hidroksilazė pavaizduota žalia spalva).
Pirminė antikūnų kontrolė yra specifinė kiekvienam naujam antikūnui ir negali būti kartojama kiekvienam eksperimentui. Antrinė antikūnų kontrolė sukurta remiantis pirminiu eksperimente naudotu antikūnu ir įtraukta į kiekvieną eksperimentą. Ženklinimo valdiklis įtraukiamas, jei pakeičiama procedūros sąlyga, pakeičiamas pavyzdys arba kai randamas netikėtas ženklinimas.
Dvi pagrindinės ICC taikymo sritys yra radijo imuninis tyrimas (RIA) ir su fermentais susijęs imunosorbentinis tyrimas (ELISA). Dažniausiai naudojamas antikūnas yra imunoglobulinas G.
Kas yra imunohistochemija (IHC)?
Imunohistochemijoje š altinio mėginyje yra monokloninių ir polikloninių antikūnų, siekiant nustatyti antigenų buvimą svetimose ląstelėse. Šis metodas pagrįstas specifine antigeno ir antikūno surišimo reakcija. Aptikimui naudojami antikūnai gali būti pažymėti skirtingais žymenimis; tai gali būti fluorescenciniai žymenys, radioaktyviai pažymėti žymenys arba cheminiai žymenys. Palengvinus antigeno ir tikslinio antikūno jungimąsi in vitro, galima nustatyti konkretaus ląstelės b altymo buvimą arba nebuvimą.
02 pav. Imunohistocheminis normalaus inksto dažymas CD10
Šiuo metu mokslininkai dalyvauja kuriant tikslinius antikūnus specifiniams antigenams, esantiems ląstelėse, kurios gali išsivystyti kaip piktybinės naviko ląstelės arba kaip antigenai, esantys infekcinių agentų, pvz., ŽIV.
Kokie yra imunocitochemijos ir imunohistochemijos panašumai?
- ICC ir IHC reakcijos yra labai specifinės ir tikslios.
- ICC ir IHC taikymas apima vėžio ir infekcinių ligų diagnostiką.
- Sterilios sąlygos turi būti palaikomos abiem sąlygomis ir jos turi būti atliekamos in vitro
- Abu metodai suteikia atkuriamų rezultatų.
- Abu greiti.
- Radijo ženklinimas, fluorescencijos metodai naudojami kaip aptikimo metodai tiek ICC, tiek IHC.
- Abu yra pagrįsti antigeno ir antikūno poravimu.
Kuo skiriasi imunocitochemija ir imunohistochemija?
Imunocitochemija (ICC) prieš imunohistochemiją (IHC) |
|
| ICC naudoja pirminius ir antrinius antikūnus surišančius žymenis, pvz., fluorescencinius žymenis arba fermentus, ir yra galingas aptikimo metodas tikslinėse ląstelėse esantiems antigenams aptikti. | IHC yra metodas, kai naudojami monokloniniai ir polikloniniai antikūnai, siekiant nustatyti antigenų, kurie yra specialūs b altymų žymenys, dedami ant ląstelių paviršių, buvimą. |
| Pavyzdinis š altinis | |
| ICC naudojami mėginiai, paimti iš audinių, kurie buvo histologiškai apdoroti plonais pjūviais. | IHC naudoja mėginius, sudarytus iš ląstelių, išaugintų viename sluoksnyje, arba ląstelių suspensijoje, kurios nusodinamos ant stiklelio. |
| Pavyzdžių apdorojimas | |
| ICC ląstelės turi būti pralaidžios, kad būtų lengviau antikūnams prasiskverbti į tarpląstelinius taikinius. | IHC ląstelės prieš dažymą fiksuojamos formalinu, įterpiamos parafinu. |
Santrauka – imunocitochemija ir imunohistochemija
Molekulinė diagnostika naudojama neinfekcinių ligų ir užkrečiamųjų ligų atsiradimui nustatyti ir patvirtinti, remiantis ląstelėse esančiais molekuliniais žymenimis. Molekuliniai žymenys gali būti b altymai arba DNR arba RNR sekos; technologijų, tokių kaip ICC ir IHC, plėtra atvėrė kelią mokslininkams ankstyvoje stadijoje nustatyti ligą ir jos priežastį. Tiek ICC, tiek IHC priklauso nuo specifinių reakcijų tarp antikūno ir antigeno, nors mėginio š altinis. Pagrindinis skirtumas tarp imunocitochemijos ir imunohistochemijos yra dviejų procedūrų mėginių apdorojimas.
Atsisiųsti imunocitochemijos ir imunohistochemijos PDF versiją
Galite atsisiųsti šio straipsnio PDF versiją ir naudoti ją neprisijungus, kaip nurodyta citatos pastaboje. Atsisiųskite PDF versiją čia. Skirtumas tarp imunocitochemijos ir imunohistochemijos.
