Pagrindinis skirtumas – hibridizacija in situ prieš imunohistochemiją
Vėžio ir infekcinių ligų diagnostika yra populiari tendencija, kai naudojami nauji proteomika ir genomika pagrįsti metodai, siekiant nustatyti navikus ar infekcines ląsteles, jų dauginimąsi ir ląstelių vystymosi vietas bei analizuoti labiausiai užkrečiamų ir užkrečiamų ligų genetinį pagrindą. neužkrečiamos ligos. Tai leis tiksliai apdoroti vaistus ir sukurti bei sukurti pritaikytus ligų gydymo būdus. In situ hibridizacija (ISH) ir imunohistochemija (IHC) yra du tokie plačiai naudojami vėžio biologijos metodai, o pagrindinis skirtumas tarp hibridizacijos in situ ir imunochemijos yra molekulėse, kurios naudojamos analizės procedūroje. ISH nukleorūgščių zondai naudojami analizei, o IHC – monokloniniai ir polikloniniai antikūnai naudojami diagnostiniams tyrimams.
Kas yra in situ hibridizacija (ISH)?
In situ hibridizacija yra nukleorūgščių hibridizacijos technika, kuri tiesiogiai atliekama tam tikrai audinio daliai ar daliai, visame audinyje arba ląstelėse. Metodas priklauso nuo Watson Crick komplementarių bazių poravimo teorijos, dėl kurios susidaro arba DNR-DNR hibridai, arba DNR-RNR hibridai, kurie gali aptikti mutavusius genus arba nustatyti reikiamą dominantį geną. Viengrandės DNR sekos, dvigrandės DNR sekos, viengrandės RNR sekos arba sintetinių oligonukleotidų sekos naudojamos kaip zondai hibridizacijos technikoje, o zondai 5' gale yra paženklinti radioaktyviu fosforu, kad būtų galima identifikuoti autoradiografijos metu arba paženklinti naudojant fluorescencinius dažus.. Atsižvelgiant į naudojamo zondo tipą ir taikomą vizualizavimo techniką, yra įvairių tipų ISH metodų.
01 pav.: Fluorescencinė hibridizacija vietoje
ISH yra daug pritaikytų, daugiausia infekcinių ligų molekulinėje diagnostikoje, siekiant nustatyti patogenų buvimą ir patvirtinti patogeną naudojant molekulinę diagnostiką. Jis taip pat naudojamas vystymosi biologijos, kariotipų nustatymo ir filogenetinės analizės bei fizinio chromosomų kartografavimo srityse.
Kas yra imunohistochemija (IHC)?
IHC metodu pagrindinė analizuojama molekulė yra antigenas. IHC metu monokloniniai ir polikloniniai antikūnai naudojami antigenų buvimui nustatyti po infekcijos ar piktybinių ląstelių proliferacijos. Metodas pagrįstas antigeno ir antikūnų surišimu, o šiam metodui naudojamos fermentų etiketės; vienas iš tokių programų yra ELISA (fermentinis imunosorbento tyrimas). Žymekliai taip pat gali būti fluorescenciniai antikūnai arba radioaktyviai pažymėti antikūnai.
02 pav.: Imunohistochemija
IHC plačiai naudojamas vėžio ląstelėms aptikti. Diagnostinės procedūros nukreiptos į naviko ląstelėse esančius antigenus, kad būtų galima nustatyti ir apibūdinti naviką. Ta pati procedūra taikoma infekcinių ligų sukėlėjams diagnozuoti. Monokloniniai ir polikloniniai antikūnai taip pat naudojami analizuojant skirtingus genų produktus, įgalinant antikūno ir antigeno surišimo reakciją tarp norimo b altymo ir įvesto sintetinio antikūno.
Kokie yra in situ hibridizacijos ir imunohistochemijos panašumai?
- ISH ir IHC yra labai specifinės reakcijos.
- Abu metodai yra labai tikslūs.
- Abu metodai gali būti naudojami vėžio ir infekcinių ligų diagnostikoje.
- Šie metodai atliekami sterilioje in vitro aplinkoje.
- Abu yra greiti metodai, užtikrinantys atkuriamus rezultatus.
- ISH ir IHC naudoja aptikimo metodus, tokius kaip radijo žymėjimas ir fluorescencijos metodai.
Kuo skiriasi in situ hibridizacija ir imunohistochemija?
In situ hibridizacija vs imunohistochemija |
|
| ISH yra nukleorūgščių hibridizacijos technika, kuri tiesiogiai atliekama tam tikrai audinio daliai ar daliai arba visam audiniui. | IHC yra metodas, kai monokloniniai ir polikloniniai antikūnai naudojami antigenų, kurie yra specialūs b altymų žymenys, dedami ant ląstelių paviršių, buvimui nustatyti. |
| Išanalizuotų biologinių molekulių tipas | |
| ISH analizuoja nukleino rūgštis. | IHC analizuoja b altymus-antigenus. |
| Biocheminės reakcijos pagrindas | |
| Šiuo metodu įvyksta papildoma bazių pora tarp DNR-DNR arba DNR-RNR. | Antigeno ir antikūnų sąveika yra susijusi su imunohistochemija. |
| Su fermentais susiję aptikimo metodai | |
| ISH negalima naudoti su fermentais susijusių aptikimo metodų. | IHC galima naudoti su fermentais susijusius aptikimo metodus. |
Santrauka – hibridizacija in situ prieš imunohistochemiją
Molekulinė diagnostika yra greiti ir patvirtinantys metodai, kuriuos galima panaudoti identifikuojant neužkrečiamą ligą, pvz., vėžį arba užkrečiamąsias ligas, tokias kaip ŽIV ar tuberkuliozė, remiantis ląstelėse esančiais molekuliniais žymenimis, dėl kurių atsiranda liga.. Molekuliniai žymenys gali būti išreikštų b altymų pavidalu arba genetiniu lygmeniu, kuriais remiantis įvedami įvairūs nauji metodai, siekiant padidinti efektyvumą ir yra mažiau pastangų reikalaujantys, nors su šiais metodais susijusios išlaidos yra didelės. Taigi ISH priklauso nuo DNR-DNR arba DNR-RNR hibrido susidarymo, o IHC priklauso nuo specifinių reakcijų tarp antikūno ir antigeno. Tai yra skirtumas tarp hibridizacijos in situ.
Atsisiųskite PDF versiją in situ hibridizacija vs imunohistochemija
Galite atsisiųsti šio straipsnio PDF versiją ir naudoti ją neprisijungus, kaip nurodyta citatos pastaboje. Atsisiųskite PDF versiją čia. Skirtumas tarp in situ hibridizacijos ir imunohistochemijos.
