Pagrindinis skirtumas tarp HEK293 ir HEK293t yra tas, kad HEK293 yra įamžinta ląstelių linija, gauta iš embrioninio žmogaus inksto, kuris yra transfekuotas nukirpta žmogaus adenoviruso 5 tipo DNR, o HEK293t yra dukterinė ląstelių linija, gauta iš HEK293 pradinės ląstelių linijos, kuri yra transfekuotas plazmidiniu vektoriumi, turinčiu SV40 replikacijos pradžią.
Transfekcija paprastai apibrėžiama kaip svetimos DNR ir RNR įvedimo į ląsteles procesas, siekiant paveikti jų genotipą ir fenotipą. Toks svetimų nukleino rūgščių įvedimas įvairiais biologiniais, cheminiais ir fiziniais metodais gali pakeisti ląstelės savybes. Galiausiai tai leidžia ištirti genų funkciją ir b altymų ekspresiją ląstelės kontekste. HEK293 ir HEK293t yra dvi ląstelių linijos, kurios daugelį metų buvo plačiai naudojamos ląstelių biologijos tyrimuose dėl jų polinkio į transfekciją.
Kas yra HEK293?
HEK293 yra įamžinta ląstelių linija, gauta iš embrioninio žmogaus inksto, kuri yra transfekuota nukirpta 5 tipo žmogaus adenoviruso DNR, kad būtų gaminama daug rekombinantinių b altymų. HEK293 iš žmogaus inkstų ląstelių iš pradžių išskyrė olandų biologas Alexas Van der Ebas 1973 m. Šios ląstelės buvo auginamos audinių kultūroje iš moters vaisiaus. Vėliau Van der Eb laboratorijos doktorantas Frankas Grahamas juos transfekavo nukirptu žmogaus adenoviruso tipo 5DNR. Ši ląstelių linija buvo pavadinta HEK293, nes tai buvo Franko 293rd eksperimentas.
01 pav.: HEK293
Adenovirusinių genų įtraukimas į HEK ląstelių genomą leidžia šioms ląstelėms labai efektyviai gaminti didelį kiekį rekombinantinių b altymų. Be to, adenovirusinis vektorius turi CMV promotoriaus sritį; taigi, tai dar labiau padidina šį efektyvumą. Ši ląstelių linija buvo naudojama kaip šeimininkas genų ekspresijos tyrimams. Šią ląstelių liniją taip pat naudoja biotechnologijų pramonė, gamindama terapinius b altymus genų terapijai.
Kas yra HEK293t?
HEK293t yra dukterinė ląstelių linija, gauta iš pirminės HEK293 ląstelių linijos, kuri yra transfekuota plazmidiniu vektoriumi, turinčiu SV40 replikacijos pradžią, kad būtų gautas didelis kiekis rekombinantinių b altymų. HEK293t yra žmogaus ląstelių linija, ekspresuojanti mutantinę SV40 didelio T antigeno versiją. HEK293t buvo sukurtas Michele Carlos laboratorijoje Stanforde, stabiliai transfekuojant HEK29E ląstelių liniją su plazmide, koduojančia temperatūrai jautrų SV40 didelio T antigeno mutantą. Iš pradžių jis buvo vadinamas 293/tsA1609neo. Taip yra todėl, kad transfekcija, naudojama kuriant ląstelių liniją, kuri suteikia atsparumą neomicinui ir SV40 didelio T antigeno tsA 1609 alelio ekspresiją.
02 pav.: HEK293t
Dėl SV40 didelio T antigeno mutantinės versijos ekspresijos, transfekuotos plazmidės, turinčios SV 40 replikacijos pradžią, gali labai padidinti rekombinantinio b altymo kiekį. Ši ląstelių linija dažniausiai naudojama biotechnologijų pramonėje b altymų ekspresijai ir rekombinantinių retrovirusų gamybai.
Kokie yra HEK293 ir HEK293t panašumai?
- HEK293 ir HEK293t yra dvi ląstelių linijos, kurios buvo plačiai naudojamos ląstelių biologijos tyrimuose dėl jų polinkio į transfekciją.
- Abi ląstelių linijos yra išvestos laboratorijoje.
- Šios ląstelių linijos gali labai padidinti rekombinantinių b altymų gamybos kiekį.
- Jie gaunami žmogaus embrionines inkstų ląsteles transfekuojant plazmidiniu vektoriumi.
Kuo skiriasi HEK293 ir HEK293t?
HEK293 yra įamžinta ląstelių linija, gauta iš embrioninio žmogaus inksto, kuris yra transfekuotas nukirpta žmogaus adenoviruso 5 tipo DNR. Priešingai, HEK293t yra dukterinė ląstelių linija, gauta iš pradinės HEK293 ląstelių linijos, kuri yra transfekuota plazmidiniu vektoriumi, turinčiu SV40 replikacijos pradžią. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp HEK293 ir HEK293t. Be to, HEK293 neišreiškia SV40 didelio T antigeno mutantinės versijos. Kita vertus, HEK293t išreiškia mutantinę SV40 didelio T antigeno versiją.
Toliau pateiktoje infografijoje lentelės pavidalu pateikiami skirtumai tarp HEK293 ir HEK293t, kad būtų galima palyginti.
Santrauka – HEK293 prieš HEK293t
HEK293 ir HEK293t yra dvi ląstelių linijos, kurios buvo plačiai naudojamos ląstelių biologijos tyrimams dėl nuolatinio augimo ir polinkio į transfekciją. HEK293 yra įamžinta ląstelių linija, gauta iš embrioninio žmogaus inksto, kuris yra transfekuotas nukirptu žmogaus adenoviruso tipo 5DNR, o HEK293t yra dukterinė ląstelių linija, gauta iš HEK293 pradinės ląstelių linijos, kuri yra transfekuota plazmidiniu vektoriumi, turinčiu SV40 replikacijos pradžią. Taigi čia apibendrinamas skirtumas tarp HEK293 ir HEK293t.
