Pagrindinis skirtumas tarp gelio ir popieriaus elektroforezės yra tas, kad gelio elektroforezės atskyrimo terpė yra agarozės gelis, o popieriaus elektroforezės atskyrimo terpė yra popieriaus juostelė, panardinta į buferinį tirpalą.
Elektroforezė yra analizės metodas, naudingas analizuojant mėginį, naudojant tame mėginyje esančių cheminių medžiagų elektrines savybes. Čia galime stebėti išsklaidytos tirpios medžiagos judėjimą analizuojamoje terpėje. Todėl galime nustatyti cheminės rūšies judėjimą terpės atžvilgiu. Gelio elektroforezė ir popieriaus elektroforezė yra du svarbūs chemijos metodai.
Kas yra gelio elektroforezė?
Gelio elektroforezę galima apibūdinti kaip makromolekulių atskyrimo ir analizės metodą, priklausomai nuo dydžio ir krūvio. Šiame kontekste makromolekulės gali reikšti DNR, RNR, b altymus ir jų fragmentus. Šis metodas yra naudingas klinikinėje chemijoje b altymams atskirti pagal krūvį arba dydį. Be to, biochemijoje ir molekulinėje biologijoje svarbu atskirti mišrią DNR ir RNR fragmentų populiaciją pagal jų ilgį, kad būtų galima įvertinti DNR ir RNR fragmentų dydį. Be to, galime jį naudoti b altymams atskirti pagal jų krūvį.
01 pav.: Gelio elektroforezės instrumentai
Nukleino rūgščių molekules galime atskirti taikydami elektrinį lauką neigiamai įkrautoms molekulėms judėti agarozės ar kitų medžiagų matricoje. Šiame procese trumpesnės molekulės gali judėti greičiau, o ilgesnės molekulės juda lėčiau. Taip yra todėl, kad trumpesnės molekulės gali lengvai judėti per gelio poras. Šį fragmentų judėjimą per poras vadiname „sijojimu“. Be to, šiuo metodu paprastai negalime atskirti b altymų pagal jų dydį, nes b altymai yra per dideli, kad juos būtų galima išsijoti iš gelio porų. Tačiau galime naudoti šį procesą nanodalelėms atskirti.
Kas yra popieriaus elektroforezė?
Popieriaus elektroforezę galima apibūdinti kaip atskyrimą naudojant buferiniame tirpale pamirkytus filtravimo popierių. Paprastai kaip buferinį tirpalą naudojame dietilbarbitūro rūgštį ir šarmuose ištirpintą barbitūro rūgštį. Šio buferinio tirpalo pH vertė yra 8,6. Be to, ant popieriaus galime uždėti nedidelį kiekį serumo, o tada kelias valandas per jį teka nuolatinė srovė.
Popieriaus elektroforezė svarbi atskiriant mažas, įkrautas molekules, įskaitant aminorūgštis ir mažus b altymus. Čia turime sudrėkinti filtravimo popieriaus juostelę buferiu ir panardinti juostelės galus į buferinius rezervuarus, kuriuose yra elektrodai. Pirmasis asmuo, kuris pranešė, kad naudojo šį metodą, buvo Konigas 1937 m. Savo išvadose jis pristatė popieriuje suvilgytą buferį zonos elektroforezei ir taip pat pasiūlė UV aptikimą.
Kuo skiriasi gelio ir popieriaus elektroforezė?
Elektroforezė yra analizės metodas, naudingas analizuojant mėginį, naudojant tame mėginyje esančių cheminių medžiagų elektrines savybes. Gelio elektroforezė ir popieriaus elektroforezė yra du svarbūs elektroforezės metodai. Pagrindinis skirtumas tarp gelio ir popieriaus elektroforezės yra tas, kad gelio elektroforezės atskyrimo terpė yra agarozės gelis, o popieriaus elektroforezės atskyrimo terpė yra popieriaus juostelė, panardinta į buferinį tirpalą.
Toliau pateikiama skirtumo tarp gelio ir popieriaus elektroforezės santrauka lentelės pavidalu, kad būtų galima palyginti.
Santrauka – gelio ir popieriaus elektroforezė
Gelio elektroforezė yra makromolekulių atskyrimo ir analizės metodas, atsižvelgiant į dydį ir krūvį, o popierinė elektroforezė yra atskyrimas naudojant buferiniame tirpale pamirkytus filtravimo popierių. Pagrindinis skirtumas tarp gelio ir popieriaus elektroforezės yra tas, kad gelio elektroforezės atskyrimo terpė yra agarozės gelis, o popieriaus elektroforezės atskyrimo terpė yra popieriaus juostelė, panardinta į buferinį tirpalą.
