Pagrindinis skirtumas tarp elektroporacijos ir mikroinjekcijos yra tas, kad elektroporacija yra metodas, kai DNR į šeimininko ląsteles tiekiamas aukštos įtampos elektros impulsas, o mikroinjekcija yra metodas, kai DNR įvedama smulkia galiuku stikline adata arba mikropipete. šeimininko ląstelės.
Transformacija yra procesas, kurio metu svetima DNR perkeliama į šeimininko ląsteles. Transformuojant, galima pakeisti genetinę organizmo sandarą. Yra įvairių cheminių, biologinių ir fizinių transformacijos būdų. Kai kurie yra tiesioginiai metodai, o kai kurie yra netiesioginiai. Elektroporacija ir mikroinjekcija yra du fiziniai metodai, kurie yra tiesioginiai transformacijos metodai. Elektroporacija naudoja elektrinį lauką, kad sukeltų mikroskopines poras biologinėse ląstelių membranose, kad DNR būtų įtraukta į šeimininko ląsteles. Kita vertus, naudojant mikroinjekciją, DNR tiesiogiai tiekiama naudojant mikropipetę arba stiklinę adatą su plonu galu.
Kas yra elektroporacija?
Elektroporacija yra transformacijos metodas, kuriuo DNR patenka į augalų ląsteles ir protoplastus. Ši technika naudoja aukštos įtampos elektros impulsą. Augalinės medžiagos inkubuojamos buferiniame tirpale, turinčiame DNR. Tada tirpalas veikiamas aukštos įtampos elektros impulsu. Augalų ląstelių membranose susidaro aukštos įtampos sukeltos poros, o per šias poras DNR migruoja ląstelių viduje ir integruojasi su augalų genomo DNR. Šio metodo efektyvumas priklauso nuo augalinių medžiagų ir apdorojimo sąlygų.
01 pav.: Elektroporacija
Kai transformacija atliekama naudojant elektroporaciją, tik 40–50 % ląstelių gauna DNR. Be to, naudojant šį metodą, tik 50 % transformuotų ląstelių gali išgyventi. Tačiau šį metodą lengva atlikti ir jis nekeičia ląstelių biologinės struktūros ar funkcijos. Be to, jį galima naudoti įvairioms ląstelėms.
Kas yra mikroinjekcija?
Mikroinjekcija yra transformacijos metodas, kuris ypač naudingas įvedant DNR į dideles ląsteles. Taikant šį metodą, naudojama smulkaus galiuko stiklinė adata arba mikropipetė DNR tiekti į augalų protoplastus arba gyvūnų ląsteles (oocitus, kiaušinėlius ir embrionus). Tiesą sakant, šis metodas labiau tinka transgeniniams gyvūnams, pavyzdžiui, pelėms, gaminti. Taikant šį metodą, DNR įterpiama tiesiai į branduolį arba citoplazmą.
Panašiai kaip elektroporacija, mikroinjekcija yra tiesioginės transformacijos technika. Mikroinjekcija atliekama specialiu mikroskopu. Kompiuterizuotas pipetės, adatos, mikroskopo scenos ir vaizdo technologijos valdymas padidino šios technikos efektyvumą. Suleidžiant DNR, galima naudoti dažus, kad būtų galima lengvai identifikuoti transformuotas ląsteles. Todėl transformuotų ląstelių identifikavimui nereikia naudoti atskiro metodo. Svarbiausia, kad mikroinjekcijos procedūrai nereikia žymeklio geno.
02 pav.: mikroįpurškimas
Be to, šis metodas yra labai efektyvus ir atkuriamas. Tačiau šis metodas yra brangus, reikalaujantis daug laiko ir reikalaujantis kvalifikuoto asmens. Be to, šiuo metodu galima apdoroti tik nedidelį ląstelių skaičių.
Kokie yra elektroporacijos ir mikroinjekcijos panašumai?
- Ir elektroporacija, ir mikroinjekcija yra dviejų tipų transformacijos metodai.
- Šiais metodais DNR patenka į augalų ląsteles ir protoplastus.
- Tai tiesioginiai metodai.
- Be to, tai yra fiziniai arba mechaniniai metodai.
- Abu metodai yra naudingi auginant transgeninius augalus ir gyvūnus.
Kuo skiriasi elektroporacija ir mikroinjekcija?
Elektroporacijos metodu DNR įvesti naudojamas elektrinis laukas, o mikroinjekcinis metodas yra mikropipetė arba stiklinė adata su smulkiu galu DNR įvesti. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp elektroporacijos ir mikroinjekcijos. Be to, elektroporacija dažniausiai naudojama augalų ląstelėms ir protoplastams, o mikroinjekcija dažniausiai naudojama gyvūnų ląstelėms. Be to, elektroporacija neužima tiek laiko, kiek mikroinjekcija.
Toliau pateiktoje infografikoje lentelės pavidalu apibendrinami skirtumai tarp elektroporacijos ir mikroinjekcijos.
Santrauka – elektroporacija prieš mikroįpurškimą
Elektroporacija ir mikroinjekcija yra du fiziniai genų perdavimo būdai. Elektroporacija naudoja aukštos įtampos elektrinį lauką, o mikroinjekcija naudoja stiklinę adatą arba mikropipetę. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp elektroporacijos ir mikroinjekcijos. Tačiau abu metodai tiesiogiai įveda egzogeninę DNR į šeimininko ląsteles.
