Pagrindinis skirtumas – HPLC ir LCMS
Pirmiausia pažvelkime į HPLC ir LCMS reikšmę prieš analizuodami skirtumą tarp HPLC ir LCMS. Chromatografija yra cheminės analizės atskyrimo metodas, kai mėginio sudedamosios dalys yra atskiriamos praleidžiant per chromatografinę terpę. Tai taip pat apima sąveiką su mėginiu, stacionaria faze ir mobiliąja faze. HPLC reiškia didelio efektyvumo skysčių chromatografiją ir yra naudojamas kaip skysčių chromatografijos metodas analitinėje chemijoje. Skysčių chromatografijos ir masių spektroskopijos (LCMS) derinys buvo sukurtas kiekybinei pasirinktų biomolekulių analizei ir yra labai jautri, tiksli ir specifinė tyrimo procedūra, palyginti su HPLC. Tai yra pagrindinis skirtumas tarp HPLC ir LCMC. Šis straipsnis supažindins jus su HPLC ir LCMC, kurie susiję su chemine analize, ir aptars HPLC ir LCMS skirtumus.
Kas yra HPLC?
Aukšto efektyvumo skysčių chromatografija (HPLC) yra populiarus atskyrimo metodas analitinės chemijos srityje. Jis daugiausia naudojamas komponentams atskirti, kiekvienam mišinio komponentui identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti. Anksčiau šis metodas buvo žinomas kaip aukšto slėgio skysčių chromatografija, nes jis priklausė nuo siurblių, kad suslėgtas skystas tirpiklis, sudarytas iš mėginio mišinio, tekėtų per kolonėlę, užpildytą kieta adsorbento medžiaga. Kiekviena mėginio mišinio sudedamoji dalis skirtingai sąveikauja su kietąja adsorbuojančia medžiaga, todėl skirtingoms sudedamosioms dalims skiriasi srautas. Dėl to gali išsiskirti sudedamosios dalys, kai jos išteka iš HPLC kolonėlės.
HPLC buvo naudojamas įvairioms reikmėms, pvz., vitamino D kiekio kraujyje analizei, nelegalių sportininkų narkotikų vartojimui, nustatant vaistų likučius jų šlapime, sudėtingo biologinio mėginio sudedamąsias dalis tyrimų ir analizės tikslais. ir vaistų gamyba.
Kas yra LCMS?
Skysčių chromatografija – masių spektrometrija (LCMS) yra analizės metodas, sujungiantis skysčių chromatografijos fizinio atskyrimo galimybes su masės spektrometrijos (MS) masės analizės galimybėmis. Skysčių chromatografija yra atskyrimo metodas, o masės spektrometrija naudojama įkrautų dalelių masės ir krūvio santykiui analizuoti. Fizinis atskyrimas paprastai pasiekiamas naudojant HPLC arba LCMS, taip pat žinomą kaip HPLC-MS. LCMS yra dominuojanti analizės technika, kuri, palyginti su HPLC, pasižymi labai dideliu tikslumu, jautrumu ir specifiškumu. Taigi jis yra naudingas daugeliui pritaikymų, pavyzdžiui, mokslinių tyrimų, vaistų analizės, maisto analizės ir kt. LCMS daugiausia naudojamas atskirti, aptikti, identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti konkretaus mėginio biochemines savybes esant sudėtingiems cheminiams mišiniams.
Kuo skiriasi HPLC ir LCMC?
HPLC ir LCMC akronimas ir apibrėžimas
HPLC: HPLC reiškia didelio efektyvumo skysčių chromatografiją. Tai atskyrimo metodas, kuris daugiausia naudojamas komponentams atskirti, kiekvienam mišinio komponentui identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti.
LCMS: LCMS reiškia skysčių chromatografiją ir masės spektrometriją. Tai analitinė technika, sujungianti skysčių chromatografijos fizinio atskyrimo galimybes su masės spektrometrijos (MS) masės analizės galimybėmis.
HPLC ir LCMC charakteristikos
Klasifikacija
HPLC: tai tik skysčių chromatografijos metodas.
LCMS: tai skysčių chromatografijos metodo ir masės spektrometrijos metodo derinys.
Efektyvumas
HPLC: Palyginti su LCMS, HPLC analizė yra mažiau efektyvi ir lėtesnė.
LCMS: Palyginti su HPLC, LCMS analizė yra efektyvi ir greitesnė.
Jautrumas
HPLC: Palyginti su LCMS, HPLC analizė yra mažiau jautri.
LCMS: Palyginti su HPLC, LCMS analizė yra jautresnė.
Specifiškumas
HPLC: Palyginti su LCMS, HPLC analizė yra mažiau specifiška.
LCMS: lyginant su HPLC, LCMS analizė yra konkretesnė.
Tikslumas
HPLC: kai kurių cheminių medžiagų nustatymo HPLC duoda ne tokius tikslius rezultatus nei LCMS.
LCMS: LCMS suteikia tikslesnius rezultatus nei HPLC kai kurioms cheminėms medžiagoms nustatyti.
Komponentas
HPLC: HPLC galima laikyti LCMS komponentu.
LCMS: LCMS negalima laikyti HPLC komponentu.
Jonų š altinis
HPLC: HPLC prietaise jonų š altinio nėra.
LCMS: LCMS prietaise yra jonų š altinis.
Programos
HPLC: jonus, polimerus, organines molekules ir biomolekules galima analizuoti naudojant HPLC.
LCMS: galima analizuoti organines molekules ir biomolekules. Priešingai nei HPLC, LCMS galima naudoti nevisiškai ištirpusiems mišiniams tirti.
Operacija
HPLC: HPLC prietaiso schema parodyta 1 paveiksle ir paprastai apima automatinį mėginių ėmiklį, siurblius ir detektorių. Mėginių ėmiklis įveda mėginio mišinį į judriąją fazę (suslėgtą tirpiklių, tokių kaip vanduo, acetonitrilas ir (arba) metanolis, mišinį), kuri perkelia jį į kolonėlę. Siurbliai per kolonėlę tiekia pageidaujamą judriosios fazės srautą ir sudėtį. Kolonėlė užpildyta adsorbentu, kuris yra grūdėta kieta dalelė, tokia kaip silicio dioksidas arba polimerai. Detektorius sukuria signalą, proporcingą mėginio sudedamųjų dalių kiekiui kolonėlėje, todėl galima kiekybiškai išanalizuoti pasirinktas mėginio sudedamąsias dalis. HPLC prietaisą valdo, o duomenų analizę atlieka skaitmeninis mikroprocesorius ir vartotojo programinė įranga.
1 pav. HPLC prietaiso schema
LCMS: LCMS prietaiso schema pateikta 2 paveiksle. Mėginio ekstraktas įterpiamas į kolonėlę, kurią sudaro HPLC. Šiame stulpelyje išlaikomi mėginių metabolitai, pagrįsti fizinėmis savybėmis, o skirtingi metabolitai skirtingais laiko intervalais patenka į masės spektrometrą. Masių spektroskopija naudojama dalelių masėms įvertinti, molekulės elementų išsidėstymui nustatyti, molekulių struktūroms išsiaiškinti. Tačiau mėginys turi būti jonizuotas, kad susidarytų įkrautos molekulės, kad būtų galima nustatyti jų masės ir krūvio santykį. Todėl vietoj HPLC prietaisų LCMS sudaro papildomi trys moduliai, tokie kaip geležies š altinis, masės analizatorius ir detektorius. Jonų š altinis gali paversti dujinės fazės mėginį į jonus ir masės analizatorių, sugrupuojantį jonus pagal jų masę, naudodamas elektromagnetinius laukus. Galiausiai detektorius kiekybiškai įvertina reikšmes ir pateikia kiekvieno mėginyje esančio jono duomenis. LCMS technika gali būti naudojama tiek kokybiniams, tiek kiekybiniams tikslams.
2 pav. LCMS prietaiso schema
Apibendrinant, HPLC yra skysčių chromatografijos metodas, o LCMS yra skysčių chromatografijos ir masės spektrometrijos derinys. Abu šie analizės metodai pasižymi skirtingomis savybėmis, tačiau juos galima naudoti norint nustatyti ir kiekybiškai įvertinti maisto sudėtį, vaistus ir kitas biologiškai aktyvias molekules.
