Pagrindinis skirtumas tarp pilimo plokštelės ir paskleidimo plokštelės yra tas, kad žinomas mėginio tūris pasklinda ant agaro terpės paviršiaus paskleidimo plokštelėje, o pilimo plokštelėje žinomas mėginio tūris sumaišomas su agaro ir tada supilkite į lėkštę. Lyginant šių dviejų metodų tikslumą, liejimo plokštės tikslumas yra didesnis nei paskleistos plokštės.
Standartinis lėkštelių skaičiavimo metodas yra augimu pagrįstas metodas, kuriuo skaičiuojamas gyvų (augančių / kultivuojamų / gyvybingų) mikroorganizmų skaičius mėginyje. Tai galingas metodas, naudojamas daugelyje mikrobiologinių sričių gyvų mikroorganizmų skaičiui analizuoti. Tokiose srityse kaip maistas ir pieno produktai, medicina, aplinka, vandens ir žemės ūkio, mikrobų genetika, molekulinė mikrobiologija, auginimo terpės kūrimas ir biotechnologijos (bioreaktorių technologija, fermentacija, atliekų / nuotekų valymas ir tt) naudojama ši technika. Be to, yra du pagrindiniai būdai, kaip atlikti standartinį lėkštelių skaičiavimą: išplitimo lėkštę ir išpylimo lėkštę.
Kas yra lėkštė?
Purimo plokštelės metodas yra mikrobinis metodas, skirtas suskaičiuoti kai kurias mėginyje esančias gyvybingas ląsteles. Lėkštelės išpilstymo metodo ypatumas yra tas, kad žinomas mėginio tūris pirmiausia sumaišomas su agaru ir tada pilamas į lėkštelę.
01 pav.: Supilkite lėkštę
Kiti veiksmai yra panašūs į paskleidimo plokštelės techniką, aptartą kitame skyriuje. Kitas žingsnis po to, kai užpilamas agaras, sumaišytas su mėginiu, yra leisti jam sukietėti ir inkubuoti. Po inkubacijos būtina suskaičiuoti gyvybingų kolonijų skaičių, kad būtų galima apskaičiuoti galutinį KSV 1 g arba 1 ml.
Kas yra paskirstyta plokštelė?
Paskirstymo plokštelė – tai būdas suskaičiuoti gyvybingas ląsteles mėginyje. Taikant šį metodą, mėginį reikia skiesti serijiniu būdu, kad būtų užtikrinta, jog bent vienas iš jų sudarytų suskaičiuojamą skaičių kolonijų. Procesas yra pipete nustatytas skiedimo tūris ant agaro plokštelės paviršiaus ir greitai bei tolygiai paskirstomas ant agaro paviršiaus stikliniu barstytuvu, kuris buvo pakaitintas alkoholiu ir atvėsintas. Norint gauti patikimą vidutinę vertę, būtina atlikti pakartojimus. Kitas žingsnis – šias plokšteles trumpam išdžiovinti, tada apversti ir įdėti į inkubatorių tinkamoje temperatūroje augimui ir nustatytam inkubacijos laikotarpiui.
02 pav.: paskirstyta plokštelė
Po inkubacijos, tiriant plokšteles, pamatysite augimą. Atskiedus vieną ar daugiau, ląstelių skaičius inokuliantuose (pvz., 100 arba 200 μl) agaro paviršiuje sudarys nuo 30 iki 300 atskirų kolonijų. Mažiau nei 30 kolonijų skaičius yra statistiškai nepatikimas. Skaičius, viršijančius 300, sunku išvardyti ir gali būti klaidų.
Kokie yra išpilstymo lėkštės ir paskirstomos lėkštės panašumai?
- Paskleidžiama lėkštė ir pilama lėkštė yra du būdai, kaip gauti mėginyje esančių gyvybingų ląstelių skaičių.
- Abu yra tiesioginiai metodai.
- Atrankos klaidos gali įvykti taikant abu metodus.
- Auginimo sąlygų apribojimai turi įtakos abiejų metodų rezultatams.
- Techninės klaidos taip pat gali trukdyti galutiniam abiejų metodų rezultatui.
- Nors šie du metodai yra gyvybingi, nenaudojami nekultūringoms bakterijoms auginti.
Kuo skiriasi pilama lėkštė ir paskirstoma lėkštė?
Pildymo plokštelė yra mikrobų metodas, skirtas suskaičiuoti gyvybingų ląstelių skaičių mėginyje. Sklaidos plokštelės metodas yra dar vienas būdas suskaičiuoti bakterijas, užaugintas terpės paviršiuje. Taikant išpylimo plokštelės techniką, mėginys pridedamas ant sustingusios terpės paviršiaus ant liejimo plokštės. Tačiau naudojant lėkštelės techniką, mėginys sumaišomas su išlydytu agaru ir supilamas į lėkštelę.
Kalbant apie šių dviejų metodų tikslumą, liejimo plokštės tikslumas yra didesnis nei paskleistos plokštės. Be to, skirtingai nei liejimo lėkštėje, stiklo skleistuvas naudojamas tolygiai paskirstyti mėginį ant paskirstytos plokštės paviršiaus. Be to, naudojant liejimo plokštę, galima išvardinti aerobus, anaerobus ir fakultatyvinius anaerobus. Tačiau naudojant sklaidos plokštę galima tik išvardinti aerobus. Be to, sustingusios agaro lėkštelės yra būtinos, norint atlikti plėvelę, o skysta išlydyta agaro terpė yra būtina pilant.
Santrauka – išpilstymo lėkštė prieš užteptą lėkštę
Pildymo plokštelė ir paskleidimo plokštelė yra du mikrobiologijos metodai, padedantys suskaičiuoti mikrobų ląsteles mėginyje. Abu metodai yra pagrįsti augimu, todėl išmatuokite gyvybingas ląsteles. Pilant lėkštelę, žinomas mėginio tūris sumaišomas su išlydytu agaru ir pilamas į lėkštelę. Paskleidimo plokštelės metu žinomas tūris pasklinda sukietėjusios agaro terpės paviršiuje. Tai yra skirtumas tarp liejimo lėkštės ir paskirstymo plokštės.
